哺乳動物瞬時表達廣泛地應用于基因產物的快速表達及蛋白質的小規模制備等方面。細胞瞬時轉染表達能夠快速靈活的制備重組蛋白,細胞在轉染后合適時機即能可收獲并進行分析.在瞬時轉染中,重組DNA導入感染性強的細胞系以獲得目的基因暫時高水平的表達。轉染的DNA不必整合進宿主染色體,當有大量樣品需要在短時間內分析時,尤其是在轉染后1到4天內收獲細胞,所得溶解產物用于檢測目的基因的表達時,可以采用瞬時轉染的方式。
哺乳動物瞬時表達適用于生成具有天然結構和活性的哺乳動物蛋白的選用表達平臺,可以實現高水平的翻譯后加工,使蛋白質獲得最佳功能活性,適合在最類似生理學的環境中研究特定蛋白質的功能。它常用于抗體和治療性蛋白質以及人類功能細胞分析的蛋白質表達。結構和性質更穩定:基于CHO和HEK293細胞的高密度表達。雙重驗證:常規和高密度瞬時表達組合鑒定。適用于高難度和低表達水平蛋白。表達水平提高:產量提高可達 100倍,重組抗體可高達 3g/L。生產周期快:從序列到蛋白/抗體僅需10周。
哺乳動物瞬時表達受體細胞應具備的條件:
遺傳穩定性:外源基因多次傳代后不至于丟失,易于長期保存。
細胞系特征:喪失細胞接觸抑制和錨地依賴特征,便于大規模培養。
安全性能好:不合成分泌致病物質,不致癌。
合適的標記:便于轉化株的篩選和維持。
生長快且齊:分裂周期短,生長均一,便于控制。
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