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氨基酸分析色譜柱的活化及維護方法介紹

來源:島津(上海)實驗器材有限公司 SGLC   2022年03月22日 14:23  
  氨基酸是構成蛋白質的基本單位,是生物、衛生、農牧業、食品、飲料及飼料等行業生產和科研中的分析測試項目,并且隨著相關行業標準的制定和完善,氨基酸的定性和定量分析將成為企業的檢測項目。
  由于氨基酸種類較多,結構接近,沒有紫外或熒光響應,使得氨基酸分析一直是高效液相色譜領域較難解決的問題之一。針對國內科研與生產單位的實際需要,開發了氨基酸分析色譜柱。
  氨基酸分析色譜柱技術包括填料技術和裝柱技術,填料技術自不待言,填料的好壞對色譜柱分離性能和選擇性有決定性影響。裝柱技術也沒有想象中的這么簡單,不同固定相、不同粒徑、不同柱管內徑和長度,裝柱工藝都有所不同,要裝出緊密、穩定、均一的柱床,更多是一門藝術,需要經驗積累。
  高效液相色譜分析中,氨基酸分析色譜柱的選擇直接影響了分離效果的好壞,選擇合適的產品可以縮短方法開發所需的時間,并且使方法更具穩定性。分析大分子量化合物選擇大孔徑色譜柱;對于高pH值或者堿性化合物需要選擇高封端或者特殊封端的色譜柱,以改善峰形,延長其使用壽命等。
  拿到一根新柱的時候應該怎樣進行活化及維護?為什么要這樣做?
  新柱活化,實際上是一個平衡的過程,除了用流動相平衡外,有時候還必須用所測樣品對新柱進行平衡,特別是測定分子量比較高的多肽,尤其重要。因為分子量高的物質分子,擴散速度慢,平衡所需時間也相應較長。
  具體平衡方式也很簡單,多進幾次樣品,直到峰面積和保留時間穩定,再進行正式進樣測定。如果要加快平衡時間,把前面用來平衡的進樣樣品濃度加大,或者不等洗脫完成,連續進樣多針。用待測物對新柱平衡,目的是將硅膠基質填料表面具有非特異性吸附的位點的吸附能力飽和掉。

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