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牛血清白蛋白(BSA)在生化實驗中的作用

來源:武漢艾美捷科技有限公司   2022年03月18日 16:41  

牛血清白蛋白(BSA)在生化實驗中有廣泛的應用例如在WB實驗中加入BSA, 通過提高溶液中蛋白質的濃度,對酶起保護作用。防止酶的分解和非特異性吸附,能減輕有些酶的變性,減輕不利環境因素如加熱,表面張力及化學因素引起的變性的。

 

牛血清白蛋白測定蛋白濃度

按50:1配置BCA工作液。10ulC液(蛋白標準)+90ulPBS液稀釋成0.5mg/ml的蛋白標準液。再分別以01248121620ul將蛋白標準液加入96孔板的第1~8標準孔中,在其他樣品孔中加入10ul待測樣品。分別加PBS定容至20ul。各孔中加入200ulBCA工作液,室溫放置2小時。用酶標儀測定蛋白濃度:測定A562,依標準曲線算出蛋白濃度。

 

牛血清白蛋白SDS-PAGE電泳

1 制 膠按比例配制分離膠,緩緩地搖動溶液,使激活劑混合均勻,將凝膠溶液平緩地注入兩層玻璃J中,再在液面上小心注入一層水,以阻止氧氣進入凝膠溶液中,靜置40min。同前按比例配制濃縮膠,但混勻溶液時不要過于劇烈以免引入過多地氧氣。吸去不連續系統中下層分離膠上的水分,連續平穩的注入凝膠溶液,然后小心插入梳子并注意不得在齒尖留有氣泡,靜制60min以上以保證*聚合。

2 預電泳: 將聚合好的凝膠安置于電泳槽中,小心拔去梳子,加入電泳緩沖液后低電壓10-20V的預電泳20-30min。(目的是清除凝膠內的雜質, 疏通凝膠孔徑以保證電泳過程中電泳的暢通)。

3 樣品準備:首先計算上樣體積,然后按樣品:上樣buffer=41的比例加入上樣bufer混勻,沸水10分鐘,冰上5分鐘。

4 加 樣: 預電泳后依次加入標準品(Marker)和待分析樣品。(加樣時間要盡量短,以免樣品擴散,可在未加樣的孔中加入等量的樣品緩沖液避免邊緣效應。每個泳道加5ul 

5 電 泳: 加樣完畢,選擇80V恒壓進行電泳,電泳直至溴酚藍染料前沿到達兩膠交界處(一般約20分鐘),更換至100V恒壓電泳,電泳直至溴酚藍染料前沿下至凝膠末端處,即停止電泳(一般約為1小時20分鐘)。

 

艾美捷牛血清白蛋白在生化實驗中有廣泛的應用,例如在western blot中作為封閉試劑.血液中的白蛋白主要起維持滲透壓作用、PH緩沖作用、載體作用和營養作用.在動物細胞無血清培養中,添加白蛋白可起到生理和機械保護作用和載體作用。

 

艾美捷牛血清白蛋白粉末,熱處理,診斷級是以USDA認證的牛源血漿作為原料,使用利的熱處理方法滅活蛋白酶并經過進一步的非溶液步驟去除脂肪和其它血漿蛋白.診斷級牛血清白蛋白粉末是專門用于減少可能會產生背景干擾以及細胞培養體系抑制等因素,該牛血清白蛋白不含蛋白酶,不含或具有很低活性的內毒素、生物負載以及IgG

 

另外,該診斷級牛血清白蛋白可用于蛋白標準品、稀釋劑、偶聯物或者酶穩定劑,也可以應用于高靈敏度的免疫分析實驗、細胞培養以及雜交實驗等.另有5kg以及10kg等更大規格包裝,是目前高質量牛血清白蛋白(BSA)科研用品。


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