293細胞系是從原代胚胎人類腎臟中建立的永丨久性細胞系人類腺病毒5型DNA。腺病毒E1區(E1a和E1b)編碼的基因是在這些細胞中表達,并參與病毒啟動子的反式激活,使這些細胞產生高水平的蛋白質。E1還補充了重組腺病毒載體中的E1缺失,允許病毒復制。我們的293/Cas9細胞系穩定表達Cas9和嘌呤霉素抗性基因。利用逆轉錄病毒將Cas9和嘌呤霉素抗性基因導入親代293細胞。
圖:293/Cas9細胞系表達Cas9蛋白。293個細胞或293/Cas9細胞用RIPA緩沖液,并使用Cell Biolab的Cas9 ELISA試劑盒(Cat#PRB-5079)檢測Cas9蛋白水平。
Cell Biolabs 艾美捷293細胞系培養方法:
從冷凍細胞建立293/Cas9培養基:
1.將10毫升完整的DMEM生長培養基放入50毫升錐形管中。解凍冷凍的食物在37°C水浴中輕輕攪拌,在1-2分鐘內冷凍細胞。凈化空氣用70%(v/v)乙醇擦拭冷凍瓶表面。
2.將解凍的細胞懸浮液轉移到含有10mL生長培養基的錐形管中。
3.在室溫下以1000 rpm的轉速離心5分鐘,收集細胞。移除通過抽吸培養基。
4.輕輕移液,將細胞重新放入錐形管中的15毫升新鮮生長培養基中然后倒下。
5.將15毫升細胞懸浮液轉移到T-75組織培養瓶中。將電池置于37°C的環境中培養箱中的二氧化碳濃度為5%。
6.每天監測細胞密度。細胞應在培養物達到95%匯合時傳代。
Cell Biolabs:細胞學試劑品牌,為生物技術和研究類客戶提供基于細胞功能研究以及疾病等方面的技術和服務。主要涵蓋細胞研究、細胞信號通路和蛋白質生物學、代謝研究、病原體和毒素、干細胞研究等領域。
Cell Biolabs 相關研究方案:
1.CBA-100:細胞選擇™ 24孔細胞遷移試驗(波頓室試驗,比色法)
2.CBA-106:細胞選擇™ 96孔細胞遷移試驗(Boyden小室試驗,熒光法)
3.CBA-110:細胞選擇™ 24孔細胞侵襲試驗(波頓室試驗,比色法)
4.CBA-120:細胞選擇™ 24孔傷口愈合試驗
艾美捷科技是Cell Biolabs的中國代理商,為科研工作者提供優質的產品與服務。
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