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一文帶您了解免疫親和柱的操作方法

來源:島津(上海)實驗器材有限公司 SGLC   2022年03月03日 14:09  
  毒素(Tetrodotoxin,TTX)是豚魚類(俗稱河豚魚)及其它生物體內含有的一種生物堿(氨基全氫喹唑啉型化合物),是自然界中所發現的毒性至大的神經毒素之一。其毒性比劇毒還要高1250多倍,0.5mg即可致人于死命。
  免疫親和柱可選擇性吸附樣品液中的毒素,從而對樣品起到非常針對性的純化作用,過柱凈化后的樣品液可直接用于HPLC分析。它與HPLC配合使用可達到快速測定的目的,以改善信噪比,提高檢測方法的準確度。
  測定的基礎是抗原抗體反應,抗體連接在柱體內,樣品經過提取、稀釋,緩慢的通過免疫親和柱,在柱內毒素與抗體結合,之后洗滌免疫親和柱除去沒有被結合的其他無關物質。用洗脫液洗脫毒素,然后注入到分析儀器中用于檢測。
  下面咱們來了解下免疫親和柱的操作方法:
  1、取出本產品,將注射器筒的下端直接穿透親和柱上方的塞子,完成柱筒與柱的連接,將其放置在氣控操作架上進行固定,去掉親和柱下方堵頭,排盡柱內保存液。
  2、取10mL的待上樣液,注入到注射器筒中。
  3、調節開關,使液體以1~2滴/秒的速度流出。
  4、待液體排干,用10mL蒸餾水洗滌1次,流速2~3滴/秒。
  5、待液體排干,往柱管內加入2mL洗脫液,堵上親和柱堵頭靜置2min,用試管收集洗脫液,流速1滴/秒,再加入2mL洗脫液,收集洗脫液,待液體排干后,將洗脫液于40℃下氮氣吹至近干,用流動相定容至1mL。
  6、混勻后用0.22μm濾器過濾至樣品瓶進行液相檢測。
  7、使用前,需回至室溫(22~25℃)。
  8、每次上樣前都要將柱內上次液體*排干。

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