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于1950年代。隨著填料和填料技術(shù)的發(fā)展，色譜柱技術(shù)越來越成熟，其功能也越來越完善。已廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)、環(huán)保、材料、食品、藥物開發(fā)等領(lǐng)域。
立柱安裝方向
色譜柱安裝應(yīng)按同一方向連接，需按照上的方向指示連接，盡量避免接反！
常見的連接有兩個(gè)主要問題。安裝時(shí)，延長管接頭長度過長，使螺紋變淺，導(dǎo)致密封不良和泄漏，進(jìn)一步造成基線漂移或響應(yīng)降低；反之，管道前段會(huì)出現(xiàn)死體積，導(dǎo)致峰形變寬，靈敏度降低。
理想的接頭連接應(yīng)具有以下特點(diǎn)：管道與界面之間無死體積；始終避免在超高壓和高溫下泄漏；優(yōu)異的長期穩(wěn)定性，防止管道滑動(dòng)；使用方便。
管道的選擇也很重要。分析液相系統(tǒng)常用的規(guī)格是內(nèi)徑為0.12和0.17mm的管道。更換管道時(shí)，首先確認(rèn)當(dāng)前管道規(guī)格，更換內(nèi)徑和長度相同的管道，否則更換前后的結(jié)果會(huì)不一致，因?yàn)楣艿赖捏w積會(huì)影響柱外體積系統(tǒng)，從而影響峰形和保留時(shí)間。
反相柱活化平衡
1)首先，用甲醇或乙腈洗滌大約20個(gè)柱體積。
2)如果流動(dòng)相含有緩沖鹽，使用與流動(dòng)相中初始比例相同比例的超純水和有機(jī)相沖洗過渡液約20次柱體積，然后平衡并用含有緩沖鹽的流動(dòng)相沖洗大約柱體積的20倍或更多。
3）如果流動(dòng)相不含緩沖鹽，可以直接用流動(dòng)相平衡柱子，大約柱體積的20倍或更多。
4)當(dāng)基線和壓力穩(wěn)定后，根據(jù)連續(xù)注射結(jié)果的再現(xiàn)測(cè)試確定平衡是否*平衡。如果不夠，可以延長流動(dòng)相的平衡時(shí)間。
反相柱沖洗并保存
1)用50:50甲醇或乙腈與水的混合溶液沖洗20-30倍柱體積；
2）用純甲醇或乙腈沖洗20-30倍柱體積；
3)存放前將柱端接頭上的塞子密封嚴(yán)密，以防止填料變干。
反相柱清洗和再生
清洗或反沖反相時(shí)，用至少30倍柱體積的下列溶劑沖洗：
將與檢測(cè)器斷開，留出末端的管線，放入接液的燒杯中，用不含緩沖鹽的流動(dòng)相（水/有機(jī)相）沖洗，然后用100%有機(jī)相（甲醇和乙腈）檢查壓力是否恢復(fù)正常。如果沒有，請(qǐng)繼續(xù)下一步。
如果壓力沒有恢復(fù)正常，丟棄或考慮使用更強(qiáng)的條件進(jìn)行清潔：75%乙腈/25%異丙醇、100%異丙醇、100%二氯甲烷、100%己烷。
值得注意的是，無論使用正己烷還是二氯甲烷，使用前或恢復(fù)使用反相流動(dòng)相前都需要用異丙醇沖洗。
關(guān)于反吹
盡管不應(yīng)輕易反吹，但當(dāng)明確知道超壓是由顆粒堵塞篩板或柱頭污染補(bǔ)救措施引起時(shí)，反吹是有效的。反吹可以快速?zèng)_洗掉顆粒物。此外，它可以快速?zèng)_出柱頂以強(qiáng)力吸附污染物。反吹后，仍處于正向連接狀態(tài)。但是，反吹也會(huì)帶來負(fù)面影響。例如，它可能會(huì)導(dǎo)致柱床松動(dòng)、保留時(shí)間的變化以及小粒徑的反吹可能會(huì)導(dǎo)致填充流動(dòng)。等待。
其中，可反吹的包括：粒徑大于2um（2.7、3、3.5、4、5μm等）；不能反吹的有：粒徑小于2um（1.8μmRRHD/RRHT；1.9μmPoroshell）。
使用中的常見問題
色譜柱使用中常見的問題包括pH值、溫度、溶劑耐受性、壓力、樣品等。的使用條件不應(yīng)超過制造商推薦的范圍，包括壓力、pH范圍、水相耐受性、柱溫等。當(dāng)測(cè)試條件接近使用范圍的極限值時(shí)，生活會(huì)受到影響。
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