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非紅細胞血影蛋白β4(SPTβN4)ELISA試劑盒?操作步驟

來源:上海研生實業有限公司   2021年11月18日 15:29  

非紅細胞血影蛋白β4(SPTβN4)ELISA試劑盒操作步驟:


1. 標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設標準品孔10孔,在di一、第二孔中分別加標準品100μl,然后在di一、第二孔中加標準品稀釋液50μl,混勻;然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為180 ng/L,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L)。

2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。

3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。

5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。

7. 溫育:操作同3。

8. 洗滌:操作同5。

9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.

10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。

11. 測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘。

小鼠血管緊張素轉化酶(mouse ACE)

小鼠雄激素結合蛋白(mouse ABP)

小鼠促腎上腺皮質激素(mouse ACTH)

小鼠Active Caspase-3

小鼠Active Caspase-7

小鼠Active Caspase-8

小鼠激活素A(mouse Activin A)

小鼠脂聯素(mouse Adiponectin)

小鼠抗線粒體抗體(mouse AMA)

小鼠抗核抗體(mouse ANA)

小鼠骨成型蛋白-4(mouse BMP-4)

小鼠骨成型蛋白受體1A(mouse BMP-R1A)

小鼠骨成型蛋白受體Ⅱ(mouse BMP-R2)

小鼠腦鈉肽(mouse BNP)

小鼠N端前腦鈉素(mouse NT-proBNP)

小鼠骨唾液酸蛋白(mouse BSP)

小鼠CXCL3(mouse CXCL-3)

小鼠CXCR4(mouse CXCR-4)

小鼠皮質酮(mouse Corticosterone)

小鼠環氧化酶-2 (mouse COX-2)

小鼠結締組織生長因子(mouse CTGF)

小鼠細胞毒性T淋巴細胞相關抗原4 (mouse CTLA-4)

小鼠細胞色素P450(mouse Cytochrome P450)

小鼠C反應蛋白(mouse CRP)

小鼠CXC趨化因子受體3(mouse CXCR3)

小鼠CXC趨化因子配體16(mouse CXCL16)

小鼠CXCL1/KC(mouse KC)


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