豬肉中喹諾酮類藥物的測(cè)定-固相萃取法+LC-MS檢測(cè)

本方案建立了以C18固相萃取柱(貨號(hào)：9B-T001-06500，描述：SuperClean C18 500mg/6ml, 30支/包)對(duì)豬肉樣品中4種喹諾酮類藥物萃取凈化方法，進(jìn)行低中高三水平基質(zhì)加標(biāo)，都能獲得滿意的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，回收率介于84%~115%之間，RSD值小于10 %。

一、樣品提取  

準(zhǔn)確稱取粉碎均勻的豬肉樣品2.0 g于干凈離心管中，加入10 mL 5%甲酸乙腈溶液，再加入1 g NaCl，2500 r/min渦旋提取10 min，8000 r/min離心2 min，取上清液5 mL氮吹近干，用5 mL 5 %甲酸水溶液復(fù)溶，待凈化。

二、樣品凈化

活化：5 mL甲醇，5 mL水   上樣：上述待凈化液   淋洗：5 mL 10 %甲醇水

洗脫：5 mL 10 %氨水甲醇收集洗脫液，氮吹近干，初始流動(dòng)相復(fù)溶，上機(jī)。

三、基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線溶液的制備

選同類型空白豬肉樣品，按上述前處理方法進(jìn)行操作，取適量的標(biāo)液配制成合適濃度的基質(zhì)曲線。

四、儀器條件

（1）色譜條件

儀器：UPLC-MS/MS（Thermo Fisher TSQ Endura）

色譜柱：菲羅門 Titank C18  3 μm  50*2.1 mm(貨號(hào)：FMB-5559-BONU)

流動(dòng)相：A：水（0.1 %甲酸）   B：甲醇（0.1 %甲酸）

洗脫方式：梯度洗脫，見表1  

流速：0.3 mL/min  

柱溫：30℃  

進(jìn)樣量：5 μL

表1 梯度洗脫程序                              

（2）質(zhì)譜條件

離子源：HESI  

電噴霧電壓：3500 V  

鞘氣壓力：40 arb  

輔氣壓力：2 arb

離子傳輸管：380 ℃  

輔氣溫度：350 ℃

表2 組分名稱、保留時(shí)間及特征離子一覽表（*為定量離子）             

五、實(shí)驗(yàn)結(jié)果

表3  4種喹諾酮類加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)結(jié)果          

 豬肉中喹諾酮類藥物的測(cè)定-固相萃取法+LC-MS檢測(cè)

圖1 添加水平為50.0 μg/kg時(shí)4種喹諾酮類的總離子流圖