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豬肉中喹諾酮類藥物的測(cè)定-固相萃取法+LC-MS檢測(cè)

來源:廣州菲羅門科學(xué)儀器有限公司   2021年11月12日 16:10  

豬肉中喹諾酮類藥物的測(cè)定-固相萃取法+LC-MS檢測(cè)

本方案建立了以C18固相萃取柱(貨號(hào):9B-T001-06500,描述:SuperClean C18 500mg/6ml, 30支/包)對(duì)豬肉樣品中4種喹諾酮類藥物萃取凈化方法,進(jìn)行低中高三水平基質(zhì)加標(biāo),都能獲得滿意的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,回收率介于84%~115%之間,RSD值小于10 %。

一、樣品提取  

準(zhǔn)確稱取粉碎均勻的豬肉樣品2.0 g于干凈離心管中,加入10 mL 5%甲酸乙腈溶液,再加入1 g NaCl,2500 r/min渦旋提取10 min,8000 r/min離心2 min,取上清液5 mL氮吹近干,用5 mL 5 %甲酸水溶液復(fù)溶,待凈化。

二、樣品凈化

活化:5 mL甲醇,5 mL水   上樣:上述待凈化液   淋洗:5 mL 10 %甲醇水

洗脫:5 mL 10 %氨水甲醇收集洗脫液,氮吹近干,初始流動(dòng)相復(fù)溶,上機(jī)。

三、基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線溶液的制備

選同類型空白豬肉樣品,按上述前處理方法進(jìn)行操作,取適量的標(biāo)液配制成合適濃度的基質(zhì)曲線。

四、儀器條件

(1)色譜條件

儀器:UPLC-MS/MS(Thermo Fisher TSQ Endura)

色譜柱:菲羅門 Titank C18  3 μm  50*2.1 mm(貨號(hào):FMB-5559-BONU)

流動(dòng)相:A:水(0.1 %甲酸)   B:甲醇(0.1 %甲酸)

洗脫方式:梯度洗脫,見表1  

流速:0.3 mL/min  

柱溫:30℃  

進(jìn)樣量:5 μL

表1 梯度洗脫程序                              

時(shí)間/min

A/%

B/%

0.00

98

2

0.25

98

2

2.00

70

30

4.00

70

30

4.20

30

70

6.20

30

70

6.50

2

98

7.80

2

98

8.00

98

2

10.00

98

2


(2)質(zhì)譜條件

離子源:HESI  

電噴霧電壓:3500 V  

鞘氣壓力:40 arb  

輔氣壓力:2 arb

離子傳輸管:380 ℃  

輔氣溫度:350 ℃

表2 組分名稱、保留時(shí)間及特征離子一覽表(*為定量離子)             

序號(hào)

名稱

保留時(shí)間/min

母離子

子離子

1

馬波沙星

3.20

363.1

320.0*342.0

2

培氟沙星

3.48

334.2

290.1*316.1

3

達(dá)氟沙星

3.92

358.2

314.1340.0*

4

二氟沙星

4.24

400.2

299.0356.1*


五、實(shí)驗(yàn)結(jié)果

表3  4種喹諾酮類加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)結(jié)果          


目標(biāo)物

10.0 μg/kg

20.0 μg/kg

50.0 μg/kg

回收率

%

RSD%

n=3

回收率

%

RSD%

n=3

回收率

%

RSD%

n=3

馬波沙星

88.8

8.04

107

2.72

90.7

6.19

培氟沙星

84.2

8.63

94.5

8.79

85.7

2.29

達(dá)氟沙星

90.9

7.94

115

6.17

96.8

6.25

二氟沙星

91.7

7.89

107

5.29

94.4

5.01


 豬肉中喹諾酮類藥物的測(cè)定-固相萃取法+LC-MS檢測(cè)


圖1 添加水平為50.0 μg/kg時(shí)4種喹諾酮類的總離子流圖



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