生物指示劑芽孢計數

計數——芽孢子數目為多少才滿足你對驗證結果的需求？生物指示劑（BI）有3、4 -log或6-log的可供使用。這表明了菌盤上孢子數目：數目越多越難去殺滅，于是挑戰就越大。

耐藥性測試或D值測試：驗證的過程中孢的藥物抗性水平是否標準？

D值是指每降低1-log微生物活性所需要的時間。即使用生物指示劑殺滅1-log嗜熱脂肪芽孢桿菌所需要的時間。如果這生物指示劑是用于6-log生物滅菌的，那有必要計算一下6-log殺菌的D值時間。因此D值為1.75分鐘的6-log生物指示劑（ BI）在10.5分鐘將會被滅活。（1.75*6=10.5分鐘）

制造商應該會提供一個關于產品菌數和D值的證書給用戶。用戶經常會抱怨每一個生物指示劑的菌數數目，任何與COA(合格證明書)或計數測試偏離的結果都會被指出。然而，由于已經發現幾乎每一個制造商用的的菌數測試法都是不同的，甚至在同一生產商的不同場所也不一樣。所以，考慮到產品固有變異率和不同計數法后，菌數計數結果不一樣也就沒有什么奇怪了。這也是為什么一般建議大家要計數三次以上再取平均值做為最后結果。

在使用生物指示劑滅菌過程中用戶會產生一些常見的錯誤觀念，導致給生物指示劑或批次貼上“壞的”標簽。使用生物指示劑時用戶經常忽略一個事實：細菌是活的。因此不管多嚴格的測試，都會存在一些內在的變異。批次的變異還有劣質BI的產生，是生產者要考慮的事情，從而盡可能減少其發生。