做實驗最怕的是什么?
早起搶儀器?
熬夜寫報告?
放假看文獻?
都不是!
最怕的是——
辛辛苦苦做了很久的實驗,
到最后才發現買的試劑盒居然是假的
那才叫一夜回到解放前
我們閱讀大量的文獻
精心設計實驗課題
事無巨細的實驗流程
這一切的努力就是為了
有一個滿意的實驗結果
可是,每當實驗結果出現偏差
我們大都只會反復檢查樣品、模板、引物序列等
很少有人會質疑購買的試劑產品
尤其是那些進口、的產品
然而,產品無處不在
在國內生物研討蓬勃發展的如今,冒充無視科學研討的謹慎性和嚴肅性,讓廣闊的科研工作者被迫造假,嚴重破壞了科研空氣,擾亂了市場秩序,滬震生物整理了一些辨別這些偽劣ELISA試劑盒的辦法,供廣闊的科研工作者和用戶參考,讓期望對廣闊科研工作者有所協助。
事實上無論在國內還是在國外,都會存在偽劣產品,我們要擦亮眼睛學會鑒別,假不亂真,假貨的出現和傳播也同樣有它的內在規律,以下是假試劑常見的現象,希望大家以后盡量避免買到假貨。
1.抗體的有效性用
重組蛋白生產的抗體不一定會和天然蛋白有效結合,必須用生物體中的蛋白去驗證重組蛋白生產的看題的有效性;
2.稀釋真品
想摻水的假酒一樣,不良商家將一份抗體稀釋成五份銷售,使抗體效價下降,與說明書標注的嚴重不符,這是試劑造假中慣用的小伎倆;
3.進口分裝
正規品牌為了保證產品質量和品質的穩定性,不會搞出口分裝,因為試劑盒中試劑都是一一對應的,很難給分裝試劑的空間,如果是進口分裝,十有八九是假貨;
4.濫竽充數,以次充好
不法商販以一些來歷不明的試劑以次充好,瓶子是回收的,質量無法保證,
5.無同源性指標出現相似的標準品數值
兩個不同甚至沒有序列同源性的試劑盒,經歷了交叉實驗后,標準品數值相似甚至相同,那么必定是假貨無疑了;
6.檢查種屬
用不同種屬的試劑盒替代,由于同一種蛋白有一定同源性,實驗結果的準確性可能會差一點
7.替換指標,真假混賣
用TGFβ以假亂真,TGFβ是在大多數哺乳類動物中廣泛表達的物質,其種屬間抗原的氨基酸序列同源性達到100%,但在實驗中會隨其他因子影響而導致表達水平發生相應變化,這些變化很難被察覺,有了這些萬能指標,公司就能以假亂真。
面對這一個假貨橫行的市場,該如何鑒別ELISA試劑盒的真假?
采購前
采購后
1.假如采購了兩盒同一公司的ELISA試劑盒A和B,使用穿插試驗即可辨別ELISA試劑盒是不是造假,辦法如下:
(1) 取出采購的試劑盒A的包被板兩條。
(2) 一條包被板加試劑盒A的規范品做規范曲線。
(3) 另一條包被板加試劑盒B的規范品做規范曲線。
(4) 后續操作依照試劑盒闡明書進行,加檢查抗體、酶復合物和底物。
(5) 試驗結束后,檢查兩條規范曲線,假如兩條規范曲線共同則闡明兩個ELISA試劑盒檢查的同一個目標而非A和B,即該試劑盒為偽劣編造ELISA試劑盒。
(6) 假如兩條規范曲線不共同則闡明兩個ELISA試劑盒檢查的不一樣目標,試劑盒A只能檢查A,不能檢查B,即該試劑盒為正常的ELISA試劑盒。
2. 使用攪擾試驗即可辨別ELISA試劑盒是不是檢查意圖抗原,辦法如下:
(1) 將對于試劑盒特異性的重組蛋白抗原和試劑盒中的檢查抗體裝備成antibody: antigen= 1:2的混合孵育液
(2) 37℃孵育15分鐘后,替代原試劑盒中的檢查抗體
(3) 后續操作依照試劑盒闡明書進行,加檢查抗體、酶復合物和底物
(4) 試驗結束后,檢查其規范曲線,假如規范曲線良好則闡明參加的意圖抗原和試劑盒抗體不匹配,試劑盒檢查抗體對于的對錯意圖抗原,該試劑盒為偽劣編造ELISA試劑盒。
(5) 假如規范曲線無線性,則闡明試劑盒檢查抗體已被意圖抗原中和或攪擾,影響了其實踐試劑盒抗體的檢查效果,則該試劑盒檢查抗體對于的是意圖抗原。
用偽劣的ELISA試劑盒坑害廣大的科研工作者,他們往往唯利是圖,無視科學研究的嚴謹性和嚴肅性,讓廣大的科研工作者被動造假,嚴重擾亂了科研工作,
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