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分享一下LB培養基的使用要點

來源:北京索萊寶科技有限公司   2021年09月26日 10:50  
  使用前經過清潔消毒,LB培養基清潔與否對工作影響較大,可影響培養基的酸鹼度,若有某些化學藥品的存在,會抑制細菌的生長。新購的培養基應先用熱水沖洗,再置于 1%或2%的鹽酸溶液中浸泡數小時,使游離鹼性物質除去(或用砂皂洗刷),再用蒸餾水沖洗二次,若要培養細菌再用高壓蒸氣滅.菌(一般在15磅高壓蒸氣),即120 ℃的溫度下30分鐘滅菌,置室溫中于燥,或用干熱滅菌,就是將培養基置于烘箱內,溫度控制在120 ℃左右的情況下維持2小時,即可殺死細菌的胞芽。經過消毒的培養基才能接種培養使用。
 
  LB培養基通常使用固體培養基制成平板培養(就是平板皿名稱的由來),平板培養基制作是將已裝好的滅菌瓊脂培養基,用溫水(無菌)熔化,取下試管的棉花塞,管口于酒精燈火焰上通過,然后微啟滅菌的培養基蓋,使試管口能深入為宜,傾入培養基后即可蓋密,再輕輕的搖勻傾入的培養基,使之均勻的、分布于皿底上疑結,即得平板培養基。由于細菌的繁殖、發育生長是與所供給的培養基(營養)有直接關系,尤其是作定量檢驗分祈,對提供營養物的多少,有決定意義,細菌培養時對營養物提供的多少,是否均勻,這對于培養基、皿底是否平整極為重要。如培養基皿底不平,瓊脂的培養基分布的厚薄隨坩喬皿皿底是否平整而有厚有薄,薄的部分營養供給就不足,這對定量分析有著密切關系,故對定量培養基皿底要求特別平整的原因所在。但作一般定性培養基(檢驗細菌、菌落生長、繁殖等),使用普通培養基即可。
 
  細菌的分離培養,一般標本中常同時混有數種細菌,如口腔咽喉菌及耳朵的分泌物、痰液、小便、大便等,凡需研究的細菌,須先用分離培養法,使其成為純培養,通過對一細菌作純培養,用肉汁加2%瓊脂的固體培養基,經保溫漏斗以脫脂棉花過濾,注入試管中,二天后檢驗新菌,再投入培養基內,先制成平板,在無菌的條件下進行接種,接種后把培養基倒置移入25一一30 ℃的恒溫箱內(倒置是避免水蒸氣凝成液滴滴人皿底內,影晌菌落的生長),通過培養進一步觀察細菌的形態和色澤,研究致病的病菌,以及對它防治的效果。

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