活化部分凝血活酶時間（APTT）檢測試劑盒產品說明書（中文版）

主要用途

  活化部分凝血活酶時間（APTT）檢測試劑是一種旨在通過腦磷脂和鞣花酸反應物，與血漿樣品混合后，加入鈣離子啟動凝血反應，產生凝塊，通過目測或凝血儀檢測，來測定樣品中凝塊形成時間的*而經典的技術方法。該技術經過精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種動物和人體血漿樣品凝血系統的檢測，以及凝血因子和抑制劑的的篩選。產品嚴格無菌，即到即用，操作簡捷，性能穩定。

技術背景

活化部分凝血活酶時間（activated partial thromboplastin time；APTT），又稱為白陶土腦磷脂凝血時間（kaolin cephalin clotting time；KCCT），是指血漿在腦磷脂（缺乏組織因子的部分凝血活酶）、接觸因子激活劑和鈣離子等的參與下，形成纖維蛋白凝塊（fibrin clot）所需的時間長度。其反映和檢測血液系統內源性（intrinsic）又稱為接觸性激活通路（contact activation pathway）和常見（common）凝血通路或機制的生理或病理狀況。內源性凝血通路或機制由凝血因子 8、9、11、12、前激肽釋放酶（prekallikrein）、高分子激肽原（high molecular weight kininogen；HMWK）等構成；而常見通路由凝血因子1、2、5、10等組成。正常活化部分凝血活酶時間通常為25至40秒。活化部分凝血活酶時間用于篩選出血傾向的病人，即內源性凝血系統異常的病人；定量檢測凝血因子2、5、8、9、10、11、12等差異和缺陷；檢測血液病理性凝血抑制劑，例如狼瘡抗凝物（lupus anticoagulant；LA）；監測肝素抗凝血療法和凝血因子替代療法。維生素K缺乏、彌散性血管內凝血（disseminated intravascular coagulation；DIC）、血管性血友病（Von Willebrand disease）、血友病（haemophilia）、遺傳性無纖維蛋白原血癥（congenital afibrinogenemia）、凝血因子缺陷、肝素、狼瘡抗凝物等導致活化部分凝血活酶時間延長；而血栓性疾病則引起活化部分凝血活酶時間縮短。其檢測方法在于使用血小板不足的血漿，血小板替代物磷脂（來自于兔腦、牛腦、大豆或腦磷脂等），接觸因子激活劑包括白陶土（kaolin）、硅藻土（celite）、二氧化硅微粒（micronized silica），或鞣花酸（ellagic acid）等，混合在一起，加入鈣離子后啟動凝血反應。

產品內容

  抗凝液（Reagent A）        毫升

  反應液（Reagent B）          毫升

  催化液（Reagent C）          毫升

  標準液（Reagent D）          微升（另購）

產品說明書              1份

保存方式

保存在4℃冰箱里；有效保證3月；  反應液（Reagent B）一旦啟用，有效保證1周

用戶自備

2毫升離心管：用于樣品操作的容器

1.5毫升離心管：用于樣品反應的容器

微型臺式離心機：用于樣品操作

培養箱或恒溫水槽：用于反應物孵育

計時器：用于反應計時

比色皿：用于樣品凝血儀測定的容器

凝血儀：用于樣品凝塊形成分析

實驗步驟

一、 血漿制備

1． 準備好2毫升離心管

2． 加入xx微升  抗凝液（Reagent A） 

3． 抽取1.8毫升血液到含  抗凝液（Reagent A）的離心管

4． 放進微型臺式離心機離心10分鐘，速度為3000g 

5． 小心移取上層黃色液體到新的2毫升離心管――此為血漿成分（注意：避免觸碰白色液體層）

6． 即刻置于冰槽里備用（注意：2小時內使用）

二、 測定準備

1． 準備好上述制備的血漿樣品

2． 設定好凝血儀并預熱

3．   催化液（Reagent C）置于37℃恒溫水槽均衡溫度

三、 凝血測定（手工操作）

1． 準備好1個1.5毫升離心管

2． 移取xx微升  反應液（Reagent B）

3． 放進37℃培養箱里孵育1分鐘

4． 加入100微升上述制備的待測樣品，混勻

5． 放進37℃培養箱里孵育3分鐘（注意：不宜超過5分鐘）

6． 即刻加入xx微升  催化液（Reagent C）；同時開啟計時器進行計時（注意：以秒計時）

7． 傾斜離心管觀察凝塊形成，直至液體凝固；同時關閉計時器結束計時

8． 正常參考范圍：

手工操作：25至35秒

凝血儀操作：23至31秒

注意事項

1． 本產品為20次操作，包括標準對照測定

2． 本產品檢測敏感度達0.01國際單位Factor VIII含量

3． 操作時，須戴手套

4． 血液采集，避免使用肝素、EDTA、草酸抗凝管

5． 樣品避免溶血，采血避免損傷組織

6． 血漿中血小板含量大于10000/毫升，以及含有雌激素、苯妥英、沃法令、納洛酮、肝素等則干擾檢測

7． 血漿樣品避免反復凍融：4℃環境維持4小時；－20℃維持2月；－80℃維持6月

8．   標準液（Reagent D）為標準對照血漿

9． 建議用戶建立自己的正常參考值范圍

10． 用戶可以使用各種自動和半自動凝血儀：例如Electra 600等進行檢測，按照儀器操作手冊操作

11． 本公司提供系列血液凝集檢測試劑產品

質量標準

1． 本產品經鑒定性能穩定

2． 本產品經鑒定檢測敏感