細胞計數板是我們在細胞實驗中常規使用的一種計量方法,那么,如何正確使用細胞計數板呢?
首先,在使用細胞計數板前,我們先了解下細胞計數板的構造。
然后,我們來說一下細胞計數板的使用步驟:清潔計數板和蓋玻片→蓋上蓋玻片→加樣→鏡檢→清洗.
這里和大家強調幾點:
1.為什么說蓋玻片很重要,因為計數區是控制深度的,0.100mm的這個深度對于計量準確性影響很大,而這個深度取決于蓋玻片和計數板的貼合程度.
2.如果不做清潔或者清潔不*,加樣過程中很容易出現空腔,如果出現空腔,就會影響到結果的準確性,需要重新清潔板子,重新加樣.
3.加樣一定是蓋好蓋玻片以后再進行加樣.
4.上樣量為10微升,需要定量.
5.加樣后需要靜置,等細胞沉降后進行鏡檢.
6.緊接著,就是最重要的環節—鏡檢。顯微鏡的操作使用就不一一贅述了,低倍鏡找區域,高倍鏡調焦,直到看清楚計數板的刻度線為止。計數的區域大家會有很多理解,其中有兩種理解:第一種是,計數區域是“L”區,第二種是,計數區域是最中心區域的四角和中間。通常情況下,我們使用的計數方法,因為通量更高,也更容易觀察。
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