血平板培養(yǎng)基又叫做血平板、血瓊脂平板培養(yǎng)基,主要用于鏈球菌及其他苛養(yǎng)菌的分離、培養(yǎng)及溶血活性的檢測。可用于臨床標(biāo)本的分離、培養(yǎng)。
血平板:(1)成分:普通營養(yǎng)瓊脂(或哥倫比亞瓊脂),脫纖維羊血(2)制法:取所需要量的普通營養(yǎng)瓊脂(或哥倫比亞瓊脂),加蒸餾水溶解后,高壓滅菌。冷卻至50℃,加入一定量(5%)的羊血,傾注平板。(3)用途:適于各類細(xì)菌的生長。
性能原理綿羊血或兔血是微生物生長繁殖的良好營養(yǎng)物質(zhì),在45-55℃的基礎(chǔ)培養(yǎng)基中加入血液可以保存血液中某些不耐熱的生長因子,促使細(xì)菌生長繁殖,由于紅細(xì)胞不破壞,有利于觀察溶血,可對細(xì)菌作初步鑒別。檢驗原理其中的蛋白胨和牛肉粉主要提供細(xì)菌生長所需要的碳源、氮源、氨基酸及維生素。氯化鈉維持培養(yǎng)基中的滲透壓,瓊脂用做凝固劑。脫纖維羊血一方面提供一些特殊的生長因子,另一方面用于觀察溶血反應(yīng)。
檢驗結(jié)果
1、溶血性鏈球菌通常呈現(xiàn)透明或半透明的灰白色小菌落(直徑1mm左右),或是較大的、粗糙的、黏液樣菌落(直徑2~4mm)。菌落周圍環(huán)繞這溶血環(huán),α-溶血的鏈球菌呈現(xiàn)半透明草綠色溶血環(huán),β-溶血的鏈球菌呈現(xiàn)透明溶血環(huán)。為了確認(rèn)是否為鏈球菌,還應(yīng)進(jìn)行革蘭氏染色觀察,因為一些非鏈球菌也可在血平板培養(yǎng)基上形成溶血環(huán)(如大腸桿菌、銅綠假單胞菌、李斯特氏菌和溶血性葡萄球菌等)。血平板培養(yǎng)基上溶血性鏈球菌的菌落數(shù)量對臨床診斷有一定參考價值。
2、葡萄球菌通常呈現(xiàn)不透明的白色或金黃色菌落,周圍環(huán)繞透明溶血環(huán)(β-溶血)或沒有溶血環(huán)。
3、李斯特氏菌可產(chǎn)生較小的β-溶血環(huán),但是可通過革蘭氏染色和動力試驗與鏈球菌區(qū)分。
4、血平板培養(yǎng)基為非選擇性培養(yǎng)基,大多數(shù)非苛養(yǎng)菌都可生長。
哥倫比亞血平板主要成分:酪蛋白胰酶消化物 ,心胰酶消化物,玉米淀粉,肉胃酶消化物,酵母浸出粉,氯化鈉,瓊脂,5%脫纖維羊血。
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