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菌種活化就是將保藏狀態的菌種放入適宜的培養基中培養，逐級擴大培養是為了得到純而壯的培養物，即獲得活力旺盛的、接種數量足夠的培養物。菌種發酵有一般需要2-3代的復壯過程，因為保存時的條件往往和培養時的條件不相同，所以要活化,讓菌種逐漸適應培養環境
要明白菌種活化的情況就需要了解菌種保藏的方式和方法。目前國際國內常用的菌種保存方法包括：定期移植法、液體石蠟法、沙土管法、真空冷凍干燥法、80℃ 冰箱凍結法、液氮超低溫凍結法。
對于不同的保存方式活化的方式也不同：
1 定期移植法的菌種復蘇較簡單，直接轉接即可；
2 液體石蠟法保存的菌種在復蘇時，挑取少量菌體轉接在適宜的新鮮培養基上，生長繁殖后，再重新轉接一次；
3 沙土管法保存菌種在復蘇時，在無菌條件下打開沙土管，取部分沙土粒于適宜的斜面培養基上，長出菌落后再轉接一次。或取沙土粒于適宜的液體培養基中，增殖培養后再轉接斜面；
4 真空冷凍干燥法保存菌種在復蘇時先用70%酒精棉花擦拭安瓿上部，將安瓿管頂部燒熱， 用無菌棉簽沾冷水，在頂部擦一圈，頂部出現裂紋，用挫刀或鑷子頸部輕叩一下，敲下已開裂的安瓿管的頂端，用無菌水或培養液溶解菌塊，使用無菌吸管移入新鮮培養基上，進行適溫培養；
5 -80℃ 冰箱凍結法保存菌種復蘇時，從冰箱中取出安瓿管或塑料凍存管，應立即放置38℃-40℃水浴中快速復蘇并適當快速搖動。直到內部結冰全部溶解為止，約需50秒-100秒。開啟安瓿管或塑料凍存管，將內容物移至適宜的培養基上進行培養
6 液氮超低溫凍結法保存菌種復蘇與-80℃ 冰箱凍結法保存菌種復蘇相似，從液氮罐中取出安瓿管或塑料凍存管，應立即放置在38℃-40℃水浴中快速復蘇并適當搖動。直到內部結冰全部溶解為止，一般約需50秒-100秒。開啟安瓿管或塑料凍存管，將內容物移至適宜的培養基上進行培養。
總結一下菌種活化需要以下幾個步驟：第一配置菌種適宜生長的培養基,第二將菌種從保藏狀態恢復到室溫狀態，比如將冷凍的菌種解凍,第三將通過操作將保藏的菌種接種到培養基中培養，此步驟稱為菌種復壯,第四步挑選培養基茁壯的菌落，挑選其中部分菌落接種到新的培養基中培養，重復此步驟2-3次，從而得到生長良好的菌落,經過這四個步驟就到達將菌種從保藏狀態活化的目的.
復蘇菌種前應準各適于該菌種生長的固體、液體培養基和培養設備，所有操作均應在符合生物安全保護及無菌條件下進行。啟開菌種宜采用鋸開法(鋸開前用70%酒精棉消毒菌種管外壁)。用吸管將液體培養基0.3ml左右注入被啟開的菌種安瓶中并吹打，使安瓶中的凍干菌種溶解成菌懸液。 將上述菌懸液全部吸出，分別接種到固體斜面和液體培養管中，一般放置在37℃培養箱培養18~24小時。對需要特殊培養條件的細菌，如需5%~10%CO2或厭氧條件等，應分別于CO2培養箱或厭氧培養箱中培養。次日觀察菌種的生長情況，如菌種未生長，應繼續培養至72小時。復蘇后的菌種在傳1~2代后使用。暫不啟開的安瓶及復蘇后需保藏的斜面應于4℃中保藏。
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