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活體成像技術：
早在1999年由美國哈佛大學Weissleder博士*提出了分子影像學(molecular imaging，MI)的概念，即應用影像學的方法對活體狀態下的生物過程進行細胞和分子水平的定性和定量研究。活體成像便是基于分子影像學孕育而生的，通過這個成像系統，可以觀測活體動物體內腫瘤的生長及轉移，感染性疾病的發展進程，特定基因的表達等生物學過程。
活體成像技術主要采用生物發光（bioluminescence）與熒光（fluorescence）兩種技術。
★生物發光是用熒光素酶基因標記細胞或DNA。
★熒光技術則采用熒光報告基團（GFP、RFP, Cyt及dyes等）進行標記。
★這一技術對腫瘤微小轉移灶的檢測靈敏度*，不涉及放射性物質和方法, 非常安全。操作極其簡單、所得結果直觀、靈敏度高。
活體成像兩種檢測技術介紹
活體成像 | 特點 | 優點 | 缺點 |
生物發光檢測 bioluminescence | ★熒光素酶（Luciferase）對基因、細胞和活體動物進行標記； ★熒光素酶催化底物（例如熒光素鉀鹽）反應后，會產生化學發光。這種光是由化學反應而來，不需要激發光； ★標記方法是通過克隆技術，將熒光素酶的基因插入到預期觀察的細胞染色體內，通過對克隆細胞進行篩選，培養出能穩定表達熒光素酶的細胞株。再將細胞株轉移至特定的小鼠體內形成模型。 | ★特異性強，無自發熒光； ★高靈敏度，在體內可檢測到幾百個細胞，檢測的深度在3-4cm； ★定量精確
| ★信號較弱，檢測時間較長；★儀器精密度要求較高； ★細胞或基因需要轉基因標記； ★不可用于人體，不適用于抗體、多肽等標記 |
熒光檢測 fluorescence | ★采用熒光報告基因 (GFP、RFP等) 或熒光染料進行標記； ★需要外接激發光源，利用報告基因、熒光蛋白質或染料產生的熒光，就可以形成體內的生物光源。 | ★熒光染料、蛋白標記能力強； ★信號強，成像速度快，操作簡便，實驗成本較低； ★未來可用于人； ★適用范圍廣，可以是動物、細胞、微生物，也可以是抗體、藥物、納米材料等。 | ★存在自發熒光，影響靈敏度； ★光容易被動物組織吸收； ★檢測深度受限； ★背景光干擾，定量準確度低 |
★生物發光檢測技術相關試劑和推薦品牌(以2020年價格為例比較)
熒光素酶及對應底物 | 底物產品品牌 （Goldbio） | 底物產品品牌 （Biotium） | 底物產品品牌（Bio-world） | 底物產品品牌（sigma） | |||||||||
螢火蟲熒光素酶firefly luciferase/底物D-Luciferin （D-熒光素）
| D-Luciferin, Potassium Salt（D-熒光素鉀鹽） | D-Luciferin,Potassium Salt（D-熒光素鉀鹽） | D-Luciferin, Potassium Salt（D-熒光素鉀鹽） | D-Luciferin, Potassium Salt（D-熒光素鉀鹽） | |||||||||
LUCK-100mg | $54 | #10101/10mg | $60 | 40400076-1/50mg | $52.9 | 50227-1mg | $158 | ||||||
LUCK-500mg | $194 | #10101-1/50mg | $176 | 40400076-2/100mg | $90.05 | ||||||||
LUCK-1g | $254($199) | #10101-2/1G | $633 | 40400076-4/1g | $278.42 | 50227-1g | $1980 | ||||||
D-Luciferin, Sodium Salt（D-熒光素鈉鹽） | D-Luciferin,Sodium Salt(D-熒光素鈉鹽) | 無鈉鹽 | D-Luciferin, Sodium Salt（D-熒光素鈉鹽） | ||||||||||
LUCNA-100mg | $54 | #10102/10mg | $70 | L6882-10mg | $252 | ||||||||
LUCNA-500mg | $194 | #10102-1/50mg | $186 | L6882-50mg | $1020 | ||||||||
LUCNA-1g | $254($199) | #10102-2/1G | $633 | L6882-100mg | $1880 | ||||||||
D-LuciferinFirefly,free acid （熒光蟲熒光素游離酸） | D-Luciferin, Free Acid(D-熒光素游離酸)
| D-Luciferin Free Acid(D-熒光素游離酸)
| D-Luciferin | ||||||||||
L-123-500mg | $209 | #10100-1/50mg | $176 | 21530055-1/50mg | $465.33 | L9504/50mg | $1100 | ||||||
L-123-1g | $276 | #10100-2/1g | $633 | 21530055-1/100mg | $956.89 | L9504/100mg | $1940 | ||||||
海腎熒光素酶Renilla luciferase/ Coelenterazine（腔腸素） | Coelenterazine(天然腔腸熒光素) | Coelenterazine(天然腔腸熒光素) | 無 | Coelenterazine, native(天然腔腸熒光素) | |||||||||
CZ2.5mg | $60 | #10110/50ug | $60 | C2230-50ug | $152 | ||||||||
CZ5mg | $93 | #10110-2/250ug | $130 | ||||||||||
CZ25mg | $329 | #10110-1/1mg | $222 | ||||||||||
Coelenterazine 400 a | Coelenterazine 400a | 無 | |||||||||||
C-320-1mg | $73 | #10125/50ug | $62 | ||||||||||
C-320-10mg | $281 | #10125-2/250ug | $135 | ||||||||||
C-320-25mg | $585 | #10125-1/1mg | $233 | ||||||||||
★螞蟻淘常年現貨LUCK-1G |
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★活體技術熒光檢測
熒光蛋白標記 | 適用于標記細胞、病毒、基因等，通常使用的是 GFP、EGFP、RFP（DsRed）等； | |
熒光染料標記 | 適用于標記抗體、多肽、小分子藥物等；常用的有 Cy3、Cy5、Cy5.5 及 Cy7 | |
量子點標記（新的標記方法） | 適用于標記腫瘤，主要應用在活細胞實時動態熒光觀察與成像； 量子點（quantum dot) 是一種能發射熒光的半導體納米微晶體，外觀恰似一極小的點狀物。量子點熒光比有機熒光染料的發射光強的 20 倍，穩定性強 100 倍以上，具有熒光發光光譜較窄、量子產率高、不易漂白、激發光譜寬、顏色可調，并且光化學穩定性高，不易分解等諸多優點。 |
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