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goldbio-活體成像技術(shù)以及相關(guān)產(chǎn)品對比

來源:蘇州螞蟻淘生物科技有限公司   2021年08月11日 11:47  

活體成像技術(shù)

早在1999年由美國哈佛大學(xué)Weissleder博士*提出了分子影像學(xué)(molecular imaging,MI)的概念,即應(yīng)用影像學(xué)的方法對活體狀態(tài)下的生物過程進(jìn)行細(xì)胞和分子水平的定性和定量研究。活體成像便是基于分子影像學(xué)孕育而生的,通過這個(gè)成像系統(tǒng),可以觀測活體動(dòng)物體內(nèi)腫瘤的生長及轉(zhuǎn)移,感染性疾病的發(fā)展進(jìn)程,特定基因的表達(dá)等生物學(xué)過程。

活體成像技術(shù)主要采用生物發(fā)光(bioluminescence)熒光(fluorescence)兩種技術(shù)。

生物發(fā)光是用熒光素酶基因標(biāo)記細(xì)胞或DNA

熒光技術(shù)則采用熒光報(bào)告基團(tuán)(GFP、RFP, Cyt及dyes等)進(jìn)行標(biāo)記。

這一技術(shù)對腫瘤微小轉(zhuǎn)移灶的檢測靈敏度*,不涉及放射性物質(zhì)和方法, 非常安全。操作極其簡單、所得結(jié)果直觀、靈敏度高

 

活體成像兩種檢測技術(shù)介紹

活體成像

特點(diǎn)

優(yōu)點(diǎn)

缺點(diǎn)

生物發(fā)光檢測

bioluminescence

熒光素酶(Luciferase)對基因、細(xì)胞和活體動(dòng)物進(jìn)行標(biāo)記;

熒光素酶催化底物(例如熒光素鉀鹽)反應(yīng)后,會產(chǎn)生化學(xué)發(fā)光。這種光是由化學(xué)反應(yīng)而來,不需要激發(fā)光;

標(biāo)記方法是通過克隆技術(shù),將熒光素酶的基因插入到預(yù)期觀察的細(xì)胞染色體內(nèi),通過對克隆細(xì)胞進(jìn)行篩選,培養(yǎng)出能穩(wěn)定表達(dá)熒光素酶的細(xì)胞株。再將細(xì)胞株轉(zhuǎn)移至特定的小鼠體內(nèi)形成模型。

特異性強(qiáng),無自發(fā)熒光;

★高靈敏度,在體內(nèi)可檢測到幾百個(gè)細(xì)胞,檢測的深度在3-4cm;

★定量精確

 

★信號較弱,檢測時(shí)間較長;★儀器精密度要求較高;

★細(xì)胞或基因需要轉(zhuǎn)基因標(biāo)記;

★不可用于人體,不適用于抗體、多肽等標(biāo)記

熒光檢測

fluorescence

采用熒光報(bào)告基因 (GFP、RFP等) 或熒光染料進(jìn)行標(biāo)記;

★需要外接激發(fā)光源,利用報(bào)告基因、熒光蛋白質(zhì)或染料產(chǎn)生的熒光,就可以形成體內(nèi)的生物光源。

★熒光染料、蛋白標(biāo)記能力強(qiáng);

★信號強(qiáng),成像速度快,操作簡便,實(shí)驗(yàn)成本較低;

★未來可用于人;

★適用范圍廣,可以是動(dòng)物、細(xì)胞、微生物,也可以是抗體、藥物、納米材料等。

★存在自發(fā)熒光,影響靈敏度;

★光容易被動(dòng)物組織吸收;

★檢測深度受限;

★背景光干擾,定量準(zhǔn)確度低

★生物發(fā)光檢測技術(shù)相關(guān)試劑和推薦品牌(以2020年價(jià)格為例比較)

熒光素酶及對應(yīng)底物

底物產(chǎn)品品牌 (Goldbio)

底物產(chǎn)品品牌 (Biotium)

底物產(chǎn)品品牌(Bio-world)

底物產(chǎn)品品牌(sigma)

螢火蟲熒光素酶firefly luciferase/底物D-Luciferin

(D-熒光素)

 

 

 

 

 

D-Luciferin, Potassium Salt(D-熒光素鉀鹽)

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無鈉鹽

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★活體技術(shù)熒光檢測

熒光蛋白標(biāo)記

適用于標(biāo)記細(xì)胞、病毒、基因等,通常使用的是 GFP、EGFP、RFP(DsRed)等;


熒光染料標(biāo)記

適用于標(biāo)記抗體、多肽、小分子藥物等;常用的有 Cy3、Cy5、Cy5.5 及 Cy7


量子點(diǎn)標(biāo)記(新的標(biāo)記方法)

適用于標(biāo)記腫瘤主要應(yīng)用在活細(xì)胞實(shí)時(shí)動(dòng)態(tài)熒光觀察與成像

量子點(diǎn)(quantum dot) 是一種能發(fā)射熒光的半導(dǎo)體納米微晶體,外觀恰似一極小的點(diǎn)狀物。量子點(diǎn)熒光比有機(jī)熒光染料的發(fā)射光強(qiáng)的 20 倍,穩(wěn)定性強(qiáng) 100 倍以上,具有熒光發(fā)光光譜較窄、量子產(chǎn)率高、不易漂白、激發(fā)光譜寬、顏色可調(diào),并且光化學(xué)穩(wěn)定性高,不易分解等諸多優(yōu)點(diǎn)。


 


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