液氮研磨儀采用了特殊的垂直上下震動模式,通過研磨珠(氧化鋯、鋼珠、玻璃珠、陶瓷珠)的高頻往復振動、撞擊、剪切,快速的實現目的。使研磨的樣品具有更加充分、更均勻、樣品重復性更好、樣品之間沒有交叉污染。
研磨方法:
空缽先用液氮預冷,再將研棒的上端用紗布包裹(用力時手不會痛),組織建議切成薄片,研磨時不易濺出,也更容易磨碎,研棒建議頂著手心,這樣便于用力。研磨過程中要避免液氮干涸,研磨至細粉即可。待液氮剛蒸發完時,用一個小藥勺取出所需用量進行下一步實驗或者將組織粉末裝人容器內,保存于一70℃的溫度下,以備下一步實驗用。使用得當的液氮研磨組織法,將為下一步實驗成功奠定了基礎。值得一提的是,操作中所有接觸的器皿及耗材須清洗干凈并消毒。如果研磨組織用于提取RNA時,使用的器皿及耗材必須采用焦碳酸二乙醋(DEPC)滅活RNase并進行高壓消毒處理。
注意事項:
1.液態氮在常壓時的溫度相當的低,一旦與物體表面接觸將迅速地沸騰,同時也會帶走相當大量的熱能。因此,使用液態氮時須額外注意,避免與皮膚的直接接觸。
2.研缽要用瓷質的,當然研杵也一樣,倒液氮的量要視你研缽的大小和實驗材料的量而定,建議你用小一點的研缽,這樣研磨的時候材料比較集中好研一點,液氮倒研缽體積的一半即可。
3.把樣品放入研缽中,倒入少量液氮,液氮就會像沸騰了一樣,這時候迅速研磨。動作一定不要太大,最好是用手心的力量往下旋轉著碾碎,動作太大會把樣品濺飛,如果樣品量很少直接就可能磨沒了。大約幾秒沸騰就結束,再磨幾下就可以再加入點液氮,重復以上過程,直到認為磨得比較細了為止。
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