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重組人GDF3影響表達的因素和解決方法

來源:賽爾瑞成(北京)生命科學技術有限公司   2021年08月05日 13:34  
  細胞因子是免疫原、絲裂原或其他刺激劑誘導多種細胞產生的低分子量可溶性蛋白質,具有調節固有免疫和適應性免疫等多種功能。細胞因子是由多種細胞產生的,具有廣泛調節細胞功能作用的多肽分子, 細胞因子不僅作用于免疫系統和造血系統,還廣泛作用于神經、內分泌系統,對細胞間相互作用、細胞的增殖分化和效應功能有重要的調節作用。
  重組人GDF3重組要求:
  1. 真實性:重組蛋白產品一致經過N末端氨基酸序列分析;必要時應用SDS-PAGE, RP-HPLC和質譜(MS)檢測其真實性。
  2. 純度:應用兩種方法分析產品純度。
  3. 生物活性:進行相應的體外或體內活性檢測。
  4. 蛋白含量:通過紫外光譜分析,電泳檢測;必要時應用HPLC定量標準蛋白溶液。
  5. 內毒素:kinetic LAL法檢測內毒素。
  6. 微生物:重組蛋白在裝瓶之前都經過濾除菌處理。
  重組人GDF3影響表達的因素和解決方法:
  影響蛋白原核表達的因素很多,如蛋白的親水性、密碼子的稀有性、蛋白毒性等。如疏水性過強,就難以表達;稀有密碼子過多或多個稀有密碼子連在一起也難以表達。首先要分析你的蛋白序列和二級結構,看看是否存在這些影響因素。如果必須要表達全長蛋白,像這種情況難度就比較大,可以進行密碼子的改造,或者更換載體,或者更換宿主菌。看試驗的目的,如果不需要表達全長蛋白,如表達部分抗原性強的片段,可以簡單一點,表達部分片段即可。

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