近日受?chē)?guó)家政策影響，內(nèi)毒素檢測(cè)試劑所用原料鱟（中國(guó)鱟及圓尾鱟）被列為國(guó)家二級(jí)保護(hù)動(dòng)物（國(guó)家林業(yè)和草原局、農(nóng)業(yè)農(nóng)村部2021年2月25日公告（2021年第3號(hào)））。

意味著內(nèi)毒素檢測(cè)試劑原料將受到嚴(yán)格管控，目前使用的東方鱟試劑將面臨被斷供的風(fēng)險(xiǎn)，國(guó)內(nèi)藥品、醫(yī)療器械放行將面臨困境。

細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法目前現(xiàn)行有兩大類(lèi)方法，即凝膠法和定量法，后者還包括濁度法、顯色基質(zhì)法和重組C因子（rFC）檢查法。

凝膠法提供了一種簡(jiǎn)單的陽(yáng)性/陰性結(jié)果判斷，定量法需要借助酶標(biāo)儀設(shè)備，讀取樣品與鱟試劑/rFC作用后吸光值/熒光值的變化，通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，計(jì)算出樣品內(nèi)毒素的含量，以量來(lái)評(píng)估是否可以放行。

目前中國(guó)藥典、美國(guó)藥典、歐洲藥典、日本藥典等都接受基于鱟試劑的膠凝法和定量法。

rFC作為一種合成試劑，可以替代來(lái)源于鱟血液的美洲鱟試劑（LAL）和東方鱟試劑（TAL）用于內(nèi)毒素檢測(cè)。rFC試劑的主要優(yōu)點(diǎn)是提高了一致性和可持續(xù)性。FDA現(xiàn)已批準(zhǔn)rFC因子作為鱟試劑的替代方案，用于生物制品的放行和過(guò)程檢測(cè)。歐盟和日本法規(guī)也均已采納rFC試劑。2020年版中國(guó)藥典通則9301附錄里面也有關(guān)于重組C因子的檢測(cè)說(shuō)明，但是如需放行檢測(cè)，還需要做相關(guān)驗(yàn)證試驗(yàn)。

Lonza的重組C因子（rFC）和美洲鱟試劑(LAL)可以幫助客戶(hù)渡過(guò)即將到來(lái)的難關(guān)，再結(jié)合合規(guī)、易用而功能強(qiáng)大的內(nèi)毒素檢測(cè)分析軟件WinkQCL，酶標(biāo)儀，自動(dòng)化的PTP工作站，可以讓內(nèi)毒素檢測(cè)既高效快速又無(wú)其他問(wèn)題。

2020年5月美國(guó)藥典將rFC作為獨(dú)立章節(jié)引入U(xiǎn)SP-NF，將鱟試劑的替代品-重組C因子（rFC）作為獨(dú)立章節(jié)引入U(xiǎn)SP-NF。該通告旨在為細(xì)菌內(nèi)毒素檢測(cè)引入更多的方法，這對(duì)于疫苗和其他注射藥物的生產(chǎn)至關(guān)重要。

USP還向病毒（COVID-19）疫苗和治療藥物的提供了有關(guān)rFC檢測(cè)的指南草案，同時(shí)表示將繼續(xù)于制定與rFC有關(guān)的獨(dú)立藥典標(biāo)準(zhǔn)。

Lonza PyroGeneTM重組C因子試劑盒是內(nèi)毒素檢測(cè)方法的發(fā)展成果。通過(guò)體外重組鱟凝血級(jí)聯(lián)反應(yīng)的個(gè)組分：C因子，重組C因子法只需一部反應(yīng)，優(yōu)于傳統(tǒng)LAL法且不依賴(lài)動(dòng)物源成分-鱟血。

PyroGeneTM重組C因子法，激活的C因子直接剪切一個(gè)熒光底物，產(chǎn)生的信號(hào)被熒光酶標(biāo)儀識(shí)別。由于熒光信號(hào)的動(dòng)態(tài)范圍大，相較于傳統(tǒng)的動(dòng)態(tài)LAL法，PyroGeneTM重組C因子法只需一步反應(yīng)，檢測(cè)范圍即可達(dá)到5.0EU/ml – 0.005 EU/ml。