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ELISA試劑盒重復性不佳,高CV值,出現白板,陽性對照不顯色怎么辦?

來源:上海仁捷生物科技有限公司   2021年07月28日 10:43  

ELISA試劑盒重復性不佳,高CV值,出現白板,陽性對照不顯色怎么辦?上海仁捷生物小編告訴您:

重復性不佳,高CV值

1

 樣品不均一

加樣前充分混勻樣品,取樣確保移液位置一致;

2

 包被板表面遭到破壞

洗板加樣時盡量小心,避免破壞板的包被表面

3

 孔與孔之間的交叉污染

孵育后取下蓋子小心操作,避免孔與孔的污染;封板膜不能重復使用

4

 加樣量不一致

樣品稀釋前應充分混勻,盡可能使用同一移液器并裝緊吸嘴

5

 邊緣效應(外周孔顯色較中心孔深)

孵育時盡量100 rpm旋轉混勻

6

 微量加樣不準確

保證微量加樣的準確性和均一性

7

 不正確的洗滌

洗液準確配制;充分洗滌,靜置15秒,確定每一步的洗滌

出現白板,陽性對照不顯色

1

 顯色液變質

更換新的顯色液

2

 洗滌液配制有誤

請按說明書所示稀釋倍數配制

3

 未加酶結合物而認為已加入

注意不要漏加

4

 終止液誤作洗滌液稀釋或當底物液使用

每次加液前均應看清標簽

5

 標準品稀釋方法錯誤/或標準品有問題

請按照說明書所示配置說明書,注意單位和稀釋倍數

6

 不同試劑盒或不同批號的試劑混用

建議使用同批次試劑盒。不能混用不同試劑盒或不同批號的試劑。

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人常見ELISA試劑盒系列

人:IL-1、IL-1α、IL-1β、IL-2、IL-2R、IL-27、IL-23、IL-17、IL-18、IL-9、IL-8、IL-6、IL-5、IL-4、IL-2、IL-13、IL-11、IL-10、IL-12P70、IL-12P40、IFN-ω、IFN-β、IFN-α、 IFN-γ、TNF-β、TNF-α、sICAM-1、LEP、MMP-3等


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