Version06062012
EDTABuffer(50×)
EDTA緩沖液(IHC抗原修復(fù)液,50×)
Cat.No.K0129
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組分說(shuō)明
Cat.No.
Volume
K0129
100ml
產(chǎn)品簡(jiǎn)介
福爾馬林固定時(shí),組織中的許多氨基酸殘基形成醛鍵、羧甲鍵而封閉了部分抗原決定簇,同時(shí)蛋白之間發(fā)生交聯(lián)也使
抗原決定簇隱蔽。因此,對(duì)于石蠟切片,要求在進(jìn)行 IHC染色前,先進(jìn)行抗原修復(fù),即將固定時(shí)分子之間所形成的交聯(lián)破
壞,恢復(fù)抗原的原有空間形態(tài)。EDTA緩沖液是除檸檬酸緩沖液外另一種常用的 IHC抗原修復(fù)液。有部分抗原用 EDTA緩
沖液修復(fù)效果好于檸檬酸緩沖液。
注意事項(xiàng)
1.請(qǐng)使用足量的修復(fù)液,修復(fù)過(guò)程中保證組織切片*浸沒(méi)在修復(fù)液中。
2.使用沸水浴或高壓修復(fù)時(shí),操作請(qǐng)務(wù)必謹(jǐn)慎,尤其高壓修復(fù)時(shí),保證鍋內(nèi)有足量的修復(fù)液,以防止干燒。
3.推薦的修復(fù)時(shí)間為達(dá)到理想修復(fù)效果所需時(shí)間,如組織粘片不牢,容易掉片,請(qǐng)酌情減少修復(fù)時(shí)間。
使用方法
1.高壓熱修復(fù):根據(jù)需要量,取適量本品,稀釋 50倍后即可使用。將稀釋好的修復(fù)液加入高壓鍋內(nèi),將待修復(fù)切片浸于
其中,保證修復(fù)液沒(méi)過(guò)組織(最好將切片浸入盛修復(fù)液的塑料容器內(nèi),再置于鍋內(nèi)修復(fù)液浴中),蓋上壓力鍋蓋,加熱
至均勻噴汽,從噴汽開(kāi)始計(jì)時(shí),1~2分鐘后壓力鍋離開(kāi)熱源,自然冷卻至室溫,取出切片,蒸餾水沖洗后,再用PBS
(0.01M pH7.4)漂洗 2次,每次 3分鐘。下接免疫組化染色步驟。此方法修復(fù)強(qiáng)度最大,是Z常用的熱修復(fù)法。
2.
微波熱修復(fù):根據(jù)需要量,取適量本品,稀釋 50倍后即可使用。將切片放入盛有修復(fù)液的容器中,置微波爐內(nèi)加熱至
沸騰,停止加熱,使容器內(nèi)液體溫度下降保持在 95℃~98℃之間并持續(xù) 10~15分鐘(注意:請(qǐng)根據(jù)具體機(jī)型酌情設(shè)置
條件,務(wù)必滿(mǎn)足以上步驟中對(duì)溫度和時(shí)間的要求)。取出容器,自然冷卻至室溫,取出切片,蒸餾水沖洗后,再用PBS
(0.01M pH7.4)漂洗 2次,每次 3分鐘。下接免疫組化染色步驟。此方法修復(fù)強(qiáng)度大于沸水浴,但小于高壓修復(fù)。
3.
沸水浴熱修復(fù):根據(jù)需要量,取適量本品,稀釋 50倍后即可使用。將待修復(fù)切片*浸入盛有修復(fù)液的容器中,并將
此容器置于盛去離子水的大器皿水浴中,電爐上加熱煮沸,從修復(fù)液的溫度到達(dá) 95℃起開(kāi)始計(jì)時(shí) 15~20分鐘。讓切片
在修復(fù)液中自然冷卻至室溫,蒸餾水沖洗,再用 PBS(0.01M pH7.4)漂洗 2次,每次 3分鐘。下接免疫組化染色
步驟。該方法效果較微波和高壓修復(fù)差。
實(shí)驗(yàn)代做服務(wù):
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