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檸檬酸緩沖液(IHC抗原修復(fù)液)常用熱修復(fù)法

來源:上海研謹(jǐn)生物科技有限公司   2021年07月26日 10:22  

 

Version06062012

CitrateBuffer100×

檸檬酸緩沖液(IHC抗原修復(fù)液,100×)



Cat.No.K0128

保存:2-8℃

組分說明

Cat.No.

Volume

K0128

100ml

產(chǎn)品簡介

福爾馬林固定時,組織中的許多氨基酸殘基形成醛鍵、羧甲鍵而封閉了部分抗原決定簇,同時蛋白之間發(fā)生交聯(lián)也使

抗原決定簇隱蔽。因此,對于石蠟切片,要求在進(jìn)行 IHC染色前,先進(jìn)行抗原修復(fù),即將固定時分子之間所形成的交聯(lián)破

壞,恢復(fù)抗原的原有空間形態(tài)。本抗原修復(fù)液適合于大多數(shù)的抗原,用該修復(fù)液修復(fù)后陽性染色明顯增強(qiáng),抗原定位理想。

注意事項


1.請使用足量的修復(fù)液,修復(fù)過程中保證組織切片*浸沒在修復(fù)液中。

2.使用沸水浴或高壓修復(fù)時,操作請務(wù)必謹(jǐn)慎,尤其高壓修復(fù)時,保證鍋內(nèi)有足量的修復(fù)液,以防止干燒。

3.推薦的修復(fù)時間為達(dá)到理想修復(fù)效果所需時間,如組織粘片不牢,容易掉片,請酌情減少修復(fù)時間。

使用方法

1.高壓熱修復(fù):根據(jù)需要量,取適量本品,稀釋100倍后即可使用(終濃度為0.01mol/L)。將稀釋好的修復(fù)液加入高壓

鍋內(nèi),將待修復(fù)切片浸于其中,保證修復(fù)液沒過組織(最好將切片浸入盛修復(fù)液的塑料容器內(nèi),再置于鍋內(nèi)修復(fù)液浴中),

蓋上壓力鍋蓋,加熱至均勻噴汽,從噴汽開始計時,1~2分鐘后壓力鍋離開熱源,自然冷卻至室溫,取出切片,蒸餾

水沖洗后,再用PBS0.01MpH7.4)漂洗2次,每次3分鐘。下接免疫組化染色步驟。此方法修復(fù)強(qiáng)度最大,是

2.最常Y的熱修復(fù)法。

微波熱修復(fù):根據(jù)需要量,取適量本品,稀釋100倍后即可使用(終濃度為0.01mol/L)。將切片放入盛有修復(fù)液的容

器中,置微波爐內(nèi)加熱至沸騰,停止加熱,使容器內(nèi)液體溫度下降保持在95℃~98℃之間并持續(xù)10~15分鐘(注意:

請根據(jù)具體機(jī)型酌情設(shè)置條件,務(wù)必滿足以上步驟中對溫度和時間的要求)。取出容器,自然冷卻至室溫,取出切片,

蒸餾水沖洗后,再用PBS0.01MpH7.4)漂洗2次,每次3分鐘。下接免疫組化染色步驟。此方法修復(fù)強(qiáng)度大于

沸水浴,但小于高壓修復(fù)。3.                  

沸水浴熱修復(fù):根據(jù)需要量,取適量本品,稀釋100倍后即可使用(終濃度為0.01mol/L)。將待修復(fù)切片*浸入盛

有修復(fù)液的容器中,并將此容器置于盛去離子水的大器皿水浴中,電爐上加熱煮沸,從修復(fù)液的溫度到達(dá)95℃起開始

計時15~20分鐘。讓切片在修復(fù)液中自然冷卻至室溫,蒸餾水沖洗,再用PBS0.01MpH7.4)漂洗2次,每次 3

分鐘。下接免疫組化染色步驟。該方法效果較微波和高壓修復(fù)差。

 

實(shí)驗代做服務(wù):

 

WB代做

HE染色

免疫熒光染色

蛋白相互作用分析

ELISA免費(fèi)代檢測

免疫組化

熒光定量PCR

番紅O固綠染色

流式細(xì)胞檢測

激光共聚焦

透射電鏡服務(wù)

DNA甲基化實(shí)驗

免疫共沉淀(Co-IP

DNA甲基化

掃描電鏡實(shí)驗

microRNA 測序

半定量RT-PCR

分子克隆和質(zhì)粒載體構(gòu)建服務(wù)

原位雜交(FIsh)

石蠟/冰凍切片

RNA結(jié)合蛋白免疫沉淀(RIP

CCK8檢測

蛋白雙向(2-D)電泳

蛋白雙向2D-WB

ATP/ADP檢測

Taqman探針

細(xì)胞劃痕

基因組DNA提取



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