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液質使用經驗

來源:檢碩科學器材(上海)有限公司   2021年07月08日 10:39  

             液質使用經驗

                  檢碩科學上海科技有限公司

經驗總結一:液質使用經驗與禁忌

1、酸性物質適合做負離子檢測,所以流動相偏堿性較合適,促使其解離,堿性物質適合做正離子檢測,流動相中適當的加入酸,促使其形成正離子,流動相中適當加一些醋酸鈉(或者醋酸銨),可形成加鈉的正離子或加銨的正離子。

液質分析中推薦使用的流動相和添加劑

推薦使用 不使用/盡量不使用

有機溶劑 反相:乙腈、甲醇、乙醇、異丙醇、四氫呋喃、二氯甲烷正相:吐侖、己烷、苯、環己烷、四氯化碳 四氫呋喃

緩沖液 乙酸銨、甲酸銨 磷酸鹽、檸檬酸鹽、碳酸鹽

乙酸、甲酸、三氟yi酸(正離子) 硫酸、高氯酸、磷酸、鹽酸、磺酸

氨水 季銨、強堿、三乙胺

其它

清潔劑、表面活性劑、離子對試劑、不揮發鹽

2、糖苷類的物質在做FABESI+時,[M+Na]峰往往比[M+H]峰要強,此為經驗,原因只是推測可能和天然產物的提取過程有關;鹽類化合物如鹽酸鹽、硫酸鹽在質譜中酸的部分一般不會出現;二羧酸鹽(esi負離子模式)除了分子離子峰外,會出現連續掉44的兩個峰,為失去羧酸根的離子,這三個峰非常特征,但是會受錐孔電壓的影響,調低電壓譜圖會更漂亮。

3、胺類物質做ESI質譜時要注意進樣量要少,因為很容易離子化,不易沖洗干凈,會影響后面樣品的測定。像三乙胺在液質聯用時不能用于調節流動相pH值。若不慎引入三乙胺,在正離子檢測時總會出現很強的102峰(三乙胺的[M+H])。

4、質譜用水一般用娃哈哈純凈水之類的就很好;質譜用甲醇和乙腈,換用了很多品牌,發現Merck的還是稍微好一些;Finnigan用的氮氣不一定要用到液氮瓶,用普通的鋼瓶氣就可以了,可能還省錢些;建議大家買一個好一點的手電筒和一個放大鏡,手電筒用來看源里面,放大鏡看你割的毛細管平整。

5、質譜的基線其實跟液相的紫外檢測器和熒光檢測器一樣,基線高的原因不外乎內部和外部的原因。

1)你選擇的流動相在質譜的響應比較高,比如水相比較多的時候,噪音比較大些;還有如果鹽含量比較大的時候,噪音更大些。

2)檢測器的靈敏度越高的時候,噪音應該越高。如果質譜的污染比較嚴重時,基線肯定比較高。比如離子阱檢測器,用得久了,阱中的離子就會增多,一方面降低了質譜的靈敏度,另一方面增加了基線噪音。

3)質譜的基線很多時候還跟你選擇的離子寬度有關。比如你作選擇離子掃描的時候,基線就低些。你作選擇反應掃描的時候,離子寬度不要選得太寬,太寬噪音就高些。

4)多級質譜一般做二級或三級質譜,基線噪音就低很多。

6、質譜維護經驗交流:做樣前-檢查氮氣,流動相,質譜儀的真空度,毛細管溫度

1) 最好不用直接進樣(容易污染離子源);

2) 做聯用時最好分流(a可以使用常規柱,b縮短分析時間,c 延長質量分析器壽命);

3) 最好使用在線切換閥,降前每個樣品的前后12分鐘的流動相切入廢液(避免樣品中的鹽進入質譜,做Sequence時可以把平衡柱子的流動相切入廢液);

4)開始聯用前,直接運行質譜數分鐘,可以先將溫度(毛細管溫度和離子源溫度(APCI))加熱到預設定值(如果是APCI源還可以避免將燒掉heater,太貴了,最好別燒);

5) 待機時將切換閥置于waste,避免剛開液相時將流動相打入離子源;

 6) 關機前毛細管的溫度先降下來,穩定一段時間后再關閉電源,避免風扇停止轉動后毛細管外圍的熱量向里擴散,容易引起內部線路及電子元器件老化加速;

7) 每天清理毛細管口外部,擦洗干凈,每次停機時注意清洗Skimmer,用無塵擦拭紙,kimberly那種;

8)如果用的是鋼瓶而且天天做樣的話,將兩個鋼瓶并聯,當然,一月不做一次的話就算了;

9) 做定量時注意離子源噴針的具體位置,否則標準曲線就不能用了;

10)不要不經過柱子分離進行定量分析,結果不可靠(競爭性抑制目標分子離子化);

11)如果是負離子檢測的話,可以相流動相中加入少量異丙醇;

 12) 不要使用不揮發性鹽,如果使用揮發性鹽,但濃度不要超過20mmol/L

 13) 需要使用酸的情況下可以用甲酸,乙酸,三氟yi酸可以用,但能用甲酸或乙酸時就別用TFA

 7、理論上液質聯用禁止使用任何不揮發性的緩沖鹽,如果需要盡量使用諸如乙酸氨等揮發性鹽,濃度不要超過20mmol/L.

 對于不揮發性的緩沖鹽,如果你的儀器有吹掃捕集的話也可使用,但一定要小心。萬不得已也不要用,首先有不揮發鹽是得不到好的離子流的,其次鹽留在質譜中很難除掉,除非停機清洗,不然一直會影響其他樣品的分析。

 可以找質譜友好的條件來做液質聯機,例如色譜條件為20mM磷酸鹽的水/乙腈流動相,做液質聯機的時候就可以用醋酸銨代替,然后用醋酸調節pH值與磷酸鹽的一致即可。

除了難揮發的鹽,三乙胺、表面活性劑、還有高濃度(>0.5%)的TFA,都對質譜不好,液質聯用的流動相中應該避免。

                                                                                                                           本篇轉至實驗之家  


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