促紅細(xì)胞生成素（EPO) 是一種高度糖基化的蛋白質(zhì)，分子量約為 30,000 - 34,000 道爾頓。人EPO是一種由165個氨基酸組成的多肽，含有一個O-連接和三個N-連接的碳水化合物鏈。重組 EPO 是用于免疫分析的天然蛋白質(zhì)的良好替代品。血清 EPO 水平取決于蛋白質(zhì)的產(chǎn)生率和清除率。90% 的 EPO 是在成人腎臟的管周細(xì)胞中產(chǎn)生的，以響應(yīng)組織氧合的減少。有證據(jù)表明，這些細(xì)胞上檢測血液氧飽和度的蛋白質(zhì)是含血紅素的部分。隨著血漿的 pO2（血細(xì)胞比容的函數(shù)）降低，EPO 濃度將增加。

血清促紅細(xì)胞生成素濃度的定量可作為確定貧血或紅細(xì)胞增多癥原因的診斷輔助手段。再生障礙性貧血、溶血性貧血和缺鐵性貧血都會導(dǎo)致血清EPO升高。然而，由于腎功能衰竭和其他疾病如獲得性免疫缺陷綜合征 (AIDS) 引起的繼發(fā)性貧血患者的 EPO 水平通常低于貧血程度。這很可能是由于患病腎臟產(chǎn)生足量 EPO8 的能力受損所致。低濃度的 EPO 可能會發(fā)出腎移植排斥反應(yīng)的早期預(yù)警。EPO 還可用于監(jiān)測接受齊多夫定 (AZT) 治療的艾滋病患者。EPO 濃度增加證實與 AZT 治療相關(guān)的貧血是由于紅細(xì)胞發(fā)育不全或發(fā)育不全。

真性紅細(xì)胞增多癥或原發(fā)性紅細(xì)胞增多癥（紅細(xì)胞量增加）是由于未受刺激的紅細(xì)胞過度產(chǎn)生所致。因此，血紅蛋白的增加會導(dǎo)致 EPO 的產(chǎn)生減少，從而導(dǎo)致血清 EPO 水平低于正常水平。繼發(fā)性紅細(xì)胞增多癥也以總紅細(xì)胞量增加為特征，是對組織缺氧引起的循環(huán) EPO 水平升高的生理反應(yīng)。缺氧可能是由于肺纖維化、心血管疾病、長期暴露于高海拔、血紅蛋白異常或藥物治療等因素造成的。一些腫瘤會產(chǎn)生 EPO，在這些情況下，EPO 可用作腫瘤標(biāo)志物來監(jiān)測治療效果。

物種：人類

樣品類型：  血清

樣品量：  200 uL

標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍：  7.5 - 500 mU/mL

靈敏度：  1.2 mU/mL

檢測時長：   2.5 小時

EPO 免疫測定是一種雙位點 ELISA（酶聯(lián)免疫吸附測定），用于測量 EPO 的生物活性 165 個氨基酸鏈。它利用兩種不同的小鼠單克隆抗體對抗人類 EPO，對 EPO 分子上明確定義的區(qū)域具有特異性。一種針對人 EPO 的小鼠單克隆抗體被生物素化，另一種針對人 EPO 的小鼠單克隆抗體用辣根過氧化物酶 (HRP) 進(jìn)行標(biāo)記以進(jìn)行檢測。 

在該測定中，校準(zhǔn)品、對照品或患者樣品在鏈霉親和素包被的微孔板中與酶標(biāo)抗體和生物素偶聯(lián)抗體同時孵育。在測定溫育結(jié)束時，洗滌微孔以除去未結(jié)合的成分，并將結(jié)合到固相的酶與底物四甲基聯(lián)苯胺 (TMB) 溫育。然后加入酸性終止溶液以終止反應(yīng)并將顏色轉(zhuǎn)化為黃色。黃色的強度與樣品中 EPO 的濃度成正比。使用從校準(zhǔn)器獲得的結(jié)果生成吸光度單位與濃度的劑量響應(yīng)曲線。對照和患者樣品中存在的 EPO 濃度直接從該曲線確定。這些標(biāo)準(zhǔn)已經(jīng)根據(jù)世界衛(wèi)生組織 (WHO) 促紅細(xì)胞生成素國際標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行了校準(zhǔn)，該標(biāo)準(zhǔn)由重組 DNA 衍生的 EPO 組成。使用的 WHO 參考標(biāo)準(zhǔn)是促紅細(xì)胞生成素第一國際標(biāo)準(zhǔn) (87/684)。