單細(xì)胞培養(yǎng)在培養(yǎng)過程中保持良好的分散狀態(tài)
單細(xì)胞培養(yǎng)重要的是把但一個(gè)目標(biāo)細(xì)胞從群體細(xì)胞群中高精準(zhǔn)、高純度、高存活率地分選捕獲出來然后培養(yǎng)分析,培養(yǎng)方法以在直接在培養(yǎng)碟中,以電腦自動(dòng)控制單細(xì)胞微吸吮捕獲、沉積分選培養(yǎng)模型為宜,也是可以是用培養(yǎng)分析跟蹤板或使用把顯微鏡升級改造為納米激光鑷捕獲操縱單細(xì)胞模型。
細(xì)胞培養(yǎng)是指酵母菌、細(xì)菌等單細(xì)胞生物的培養(yǎng),或取多細(xì)胞生物體上的一個(gè)細(xì)胞的無菌培養(yǎng),從多細(xì)胞生物中得到單細(xì)胞的辦法是,開始對切離的組織的初始培養(yǎng)物進(jìn)行振蕩培養(yǎng),然后在連續(xù)培養(yǎng)中用適當(dāng)?shù)暮Y孔將游離的細(xì)胞分篩出來,再將收集起來的游離的單細(xì)胞懸浮在液體培養(yǎng)基中,用微量吸管吸取一個(gè)細(xì)胞。動(dòng)物細(xì)胞的單細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),要適當(dāng)稀釋接種,為使得到的單細(xì)胞進(jìn)行增殖,可以采用微量培養(yǎng)法和保護(hù)培養(yǎng)法,對浮游的單細(xì)胞群進(jìn)行平面培養(yǎng)。
單細(xì)胞培養(yǎng)利用固體瓊脂培養(yǎng)基對植物的離體組織進(jìn)行培養(yǎng)的方法在植物遺傳實(shí)驗(yàn)中已經(jīng)得到廣泛的應(yīng)用。當(dāng)植物的組織在液體培養(yǎng)基中生長時(shí),可以通過薄層震蕩培養(yǎng)或向培養(yǎng)基中通氣用以改善培養(yǎng)基中氧氣的供應(yīng),植物細(xì)胞的懸浮培養(yǎng)是指將植物細(xì)胞或較小的細(xì)胞團(tuán)懸浮在液體培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng),在培養(yǎng)過程中能夠保持良好的分散狀態(tài)。這些小的細(xì)胞聚合體通常來自植物的愈傷組織。
在繼代培養(yǎng)時(shí),應(yīng)將較大的細(xì)胞團(tuán)塊和接種物殘?jiān)?,若從植物器官或組織開始建立細(xì)胞懸浮培養(yǎng)體系,就包括愈傷組織的誘導(dǎo)、繼代培養(yǎng)、單細(xì)胞分離和懸浮培養(yǎng),廣泛應(yīng)用于細(xì)胞的形態(tài)、生理、遺傳、凋亡等研究工作,特別是為基因工程在植物細(xì)胞水平上的操作提供了理想的材料和途徑。經(jīng)過轉(zhuǎn)化的植物細(xì)胞再經(jīng)過誘導(dǎo)分化形成植株,即可獲得攜帶有目標(biāo)基因的個(gè)體。
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