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看!!!動(dòng)物性食品中環(huán)丙氨嗪及代謝物三聚氰胺測(cè)定的前處理方法

來源:壇墨質(zhì)檢科技股份有限公司   2021年05月13日 09:07  

環(huán)丙氨嗪的危害及檢測(cè)目的

環(huán)丙氨嗪,又名“滅蠅胺”,養(yǎng)殖場(chǎng)通常稱為“蠅蛆凈”,屬于1, 3, 5-三嗪類昆蟲生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑。環(huán)丙氨嗪也是一種高效的昆蟲生長(zhǎng)抑制劑, 常作為飼料添加劑廣泛應(yīng)用于畜牧業(yè)動(dòng)物飼料中,以原藥以及代謝產(chǎn)物的形式隨糞便排出體外,并沉積在糞便中以殺滅糞便中的蠅蛆,從而控制畜禽舍以及周圍環(huán)境中的有害昆蟲,達(dá)到凈化環(huán)境的目的,且能提高動(dòng)物生長(zhǎng)性能。在動(dòng)物養(yǎng)殖生產(chǎn)過程中,許多養(yǎng)殖戶為了減少養(yǎng)殖場(chǎng)的蚊蠅,把環(huán)丙氨嗪長(zhǎng)期應(yīng)用于動(dòng)物飼料中,導(dǎo)致畜禽肌肉組織中藥物殘留超標(biāo),嚴(yán)重威脅著消費(fèi)者身體健康。為此我國(guó)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部和國(guó)家市場(chǎng)監(jiān)督管理總局2019年發(fā)布的GB 31650-2019《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中獸藥最 大殘留*》中明確規(guī)定了環(huán)丙氨嗪在動(dòng)物靶組織中的殘留*,并且規(guī)定泌乳期禁用。

本文闡述了如何將環(huán)丙氨嗪和三聚氰胺從樣品基質(zhì)中分離提取出來,并經(jīng)過凈化后,轉(zhuǎn)化成液質(zhì)聯(lián)用儀可以檢測(cè)的形式。以提取、凈化為重點(diǎn),依據(jù)國(guó)標(biāo)GB 29704-2013,為檢測(cè)人員和相關(guān)領(lǐng)域研究人員提供一定的參考。

檢測(cè)項(xiàng)目:環(huán)丙氨嗪、三聚氰胺

應(yīng)用范圍:雞的肌肉、腎臟和蛋

超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法

方法原理:試料中殘留的環(huán)丙氨嗪及代謝物三聚氰胺,用3 %三氯(乙)乙酸溶液提取,MCX柱凈化,超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定,外標(biāo)法定量。

前處理儀器:

分析天平(感量0.00001 g0.01 g);渦旋混合器;離心機(jī);氮吹儀;離心管(50 mL),微孔濾頭(0.2 μm);固相萃取裝置。

檢測(cè)儀器:UHPLC-MS/MS+ESI

 

樣品的制備與保存

  • 雞蛋

取新鮮或冷凍空白或供試雞蛋,去殼,并使均質(zhì)。

取均質(zhì)后的供試樣品,作為供試試料;

取均質(zhì)后的空白樣品,作為空白試料;

取均質(zhì)后的空白樣品,添加適宜濃度的標(biāo)準(zhǔn)工作液,作為空白添加試料。

 

  • 雞的肌肉和腎臟組織

取新鮮或冷凍空白或供試組織,絞碎,并使均質(zhì)。

取均質(zhì)后的供試樣品,作為供試試料;

取均質(zhì)后的空白樣品,作為空白試料;

取均質(zhì)后的空白樣品,添加適宜濃度的標(biāo)準(zhǔn)工作液,作為空白添加試料。

所有試料在零下20 ℃ 以下保存。

 

前處理方法

1.提取

稱取試料2 g±0.02 g50 mL離心管中,加3 %三氯(乙)乙酸溶液20 mL,渦旋混合30 s,超聲10 min,靜置10 min10000 r/min離心10 min取上層液,備用。

2.凈化

MCX柱(60 mg3 mL)依次用甲醇3 mL和水3 mL活化,取備用液10 mL過柱,加2 %甲酸水溶液3 mL、甲醇3 mL淋洗,抽干,加5 %氨化甲醇溶液3 mL洗脫,抽干,收集洗脫液,于50  氮?dú)獯蹈桑?/font>50 %乙腈水溶液1.0 mL溶解殘余物,濾膜過濾,供液質(zhì)測(cè)定。

 

國(guó)標(biāo)解讀及注意事項(xiàng)

1.標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)用50 %乙腈水溶液配成1 mg/mL標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液,在2 ℃8 ℃避光保存,可使用3個(gè)月。

2.本方法使用三氯(乙)乙酸溶液提取目標(biāo)化合物陽離子交換柱進(jìn)行富集凈化稀釋倍數(shù)=2,相當(dāng)于1 g試料進(jìn)行上機(jī)檢測(cè)。

3.固相萃取過程中需要控制流速,使溶液一滴一滴地流下,以保證離子交換的效果。

4.氨水甲醇溶液現(xiàn)用現(xiàn)配,避免氨水揮發(fā),影響洗脫效果;洗脫過程中洗脫溶劑少量多次加入,可以增加洗脫率

5.由于環(huán)丙氨嗪和三聚氰胺極性比較強(qiáng),建議選用長(zhǎng)的(150 mm)親水型色譜柱,保證色譜峰的保留效果。

6.本方法使用基質(zhì)曲線進(jìn)行定量,還可以使用環(huán)丙氨嗪和三聚氰胺相對(duì)應(yīng)的同位素內(nèi)標(biāo)配制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

 

 

參考文獻(xiàn)

GB 29704-2013 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 動(dòng)物性食品中環(huán)丙氨嗪及代謝物三聚氰胺多殘留的測(cè)定 超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法


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