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[深度好文】牛奶中左旋咪唑殘留量測定的前處理方法

來源:壇墨質檢科技股份有限公司   2021年04月30日 09:48  

左旋咪唑的危害及檢測目的

左旋咪唑作為一種廣譜型抗線蟲藥,藥源豐富,被廣泛應用于畜禽養(yǎng)殖企業(yè),效果良好。但不合理地使用左旋咪唑會造成動物產(chǎn)品中殘留,研究表明,人體攝入過量左旋咪唑可引起畸變、癌變等癥狀,嚴重危害人類健康。為此我國農(nóng)業(yè)農(nóng)村部和國家市場監(jiān)督管理總局2019年發(fā)布的GB 31650-2019《食品安全國家標準食品中獸藥最/大殘留*》中明確規(guī)定了左旋咪唑在動物靶組織中的殘留*,并且規(guī)定泌乳期和產(chǎn)蛋期禁用。

本文闡述了如何將左旋咪唑從樣品基質中分離提取出來,并經(jīng)過凈化后,轉化成高效液相色譜儀可以檢測的形式。以提取、凈化為重點,依據(jù)國標GB 29681-2013,為檢測人員和相關領域研究人員提供一定的參考。

檢測項目:左旋咪唑

應用范圍:牛奶

高效液相色譜法

方法原理:試料中殘留的左旋咪唑,用碳酸鹽緩沖液和乙酸乙酯溶液提取,C18柱凈化甲醇洗脫高效液相色譜測定外標法定量

前處理儀器:

分析天平(感量0.00001 g0.01 g);均質機;冷凍高速離心機;電熱恒溫水浴鍋;旋渦混合器;茄形瓶50 mL);離心管;濾膜(0.45 μm)。

檢測儀器: HPLC-PDA 

 

 

 

試樣的制備與保存

取適量新鮮或冷藏的空白或供試牛奶,混合均質。

取均質后的供試樣品,作為供試試料;

取均質后的空白樣品,作為空白試料;

取均質后的空白樣品,添加適宜濃度的標準工作液,作為空白添加試料。

試料于零下20 ℃以下保存。

 

前處理方法

1.提取

稱取試料5 g± 0.05 g,于離心管中,加碳酸鹽緩沖液5 mL,加乙酸乙酯10 mL,混勻,6000 r/min離心10 min,取上清液于茄形瓶中,再加乙酸乙酯10 mL萃取一次,合并兩次上清液,于50 ℃水浴旋轉蒸發(fā)至干,加碳酸鹽緩沖液5 mL溶解殘余物,備用。

2.凈化

C18柱(3 mL/500 mg)依次用水3 mL、甲醇3 mL碳酸鹽緩沖液3 mL活化,取備用液過柱,用水3 mL淋洗,用甲醇5 mL洗脫,收集洗脫液,于50 ℃水浴氮氣吹干,用流動相1.0 mL溶解殘余物,濾膜過濾,供高效液相色譜測定。

 

 

國標解讀及注意事項

1.左旋咪唑用甲醇配成1 mg/mL標準儲備液,在2 4 ℃保存,可使用3個月。

2.本方法使用碳酸鹽緩沖液提取,乙酸乙酯萃取,C18固相萃取柱凈化的方式進行目標化合物的提取凈化。

3.本方法采用兩次萃取的方式,提高目標化合物的回收率。

4.為保證固相萃取凈化效果,過柱時需要控制流速,使溶液一滴一滴地流下。水淋洗后*抽干小柱,再進行洗脫。

5.左旋咪唑也可以使用液質聯(lián)用儀進行檢測同時添加相對應的鹽酸鹽同位素內標進行回收率的校正

 

 

參考文獻

GB 29681-2013 食品安全國家標準 牛奶中左旋咪唑殘留量的測定 高效液相色譜法

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