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技術分享:細胞培養中如何預防老化?

來源:上海滬鼎生物科技有限公司   2021年02月04日 10:24  

防止細胞老化主要還是要做到勤觀察、勤換液、勤傳代、勤保種,特別是傳代,不能等細胞太密了之后傳,一般細胞建議長到70%融合度傳代完好;換培養液應該根據自己細胞消耗培養基的情況來確定是否該換。如果感覺時間不好把握的話就多培養幾瓶細胞,在不同的時間換液,后再來比較下,看什么時候換液好,得出自己的結論。

 

選擇正確的血清與培養基:細胞對血清特別敏感,直接影響細胞的生長。一定要選擇適合的血清不然就會因營養物質不協調而導致細胞老化;在間充質干細胞培養時必然要進行消化,但是消化對細胞的表面蛋白質有很強的破壞作用,因此不能長時間進行消化并且在選擇消化酶時也要選擇較為合適的pH和濃度,不然就會使細胞老化或者分化。雖然,老化細胞不會立即死亡,但其基因表達會發生變化,如果細胞老化現象嚴重,建議從種子庫或工作庫重新復蘇細胞。

 

在進行細胞培養時,我們經常會聽到一些專業名詞,原代培養是什么?什么是世代數?細胞系是什么?。根據老師們的反饋,我們總結了以下容易混淆的概念供大家參考~

1、原代培養(Primary culture)

開始于直接取自生物體的細胞、組織或器官的培養稱為原代培養。通常代表異質細胞群,很難標準化和繁殖。它們的壽命一般有限,而且已知它們會隨著時間而改變其差異特征。

2、傳代(Passage(Subculture))

細胞從一個皿里轉移或傳代到另一皿里的過程稱為細胞傳代。這是一個操作行為,無法準確定義細胞分裂次數。

3、傳代次數(Passage number)

一種細胞被傳代培養的次數稱為傳代次數。

4、世代數(Generation number)

一種細胞所經歷的細胞數量倍增次數稱為世代數。

5、群體倍增時間(Population doubling time)

在對數生長期中期細胞數量翻倍所需要的時間間隔稱為群體倍增時間。

6、群體倍增次數(Population doubling)

在培養過程中細胞所經歷的細胞數量倍增次數稱為群體倍增次數。

7、細胞系(Cell line)

原代細胞經過第①次傳代后增殖的細胞稱為細胞系或亞克隆。隨著細胞的傳代,生長能力強的細胞會占據優勢,終導致細胞群體在基因型和表現型上達到一定程度的均一性。

8、細胞株(Cell strain)

細胞系通過選擇或克隆獲得的具有特征的細胞系稱為細胞株。與親代細胞系起始時相比,細胞株往往會獲得其他一些遺傳學改變。

 

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