小鼠KI-67抗原MKI67酶聯(lián)檢測試劑盒標(biāo)本要求
小鼠KI-67抗原MKI67酶聯(lián)檢測試劑盒標(biāo)本要求:
1. 血清:溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
2. 血漿:根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或其他作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
3. 尿液:無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑,用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
捕獲法測抗體的簡要操作步驟:
1)特異性捕獲抗體的包被,先把能特異性結(jié)合待測抗原的抗體固定于固相載體表面;
2)加入待測樣品,通過固定在載體表面的針對該抗原的抗體固定于載體表面;
3)加入特異性抗原以及針對該特異性抗原的酶標(biāo)抗體;
4)加入酶促反應(yīng)底物,發(fā)生顯色反應(yīng),顯色的深淺與待測抗體的量成正比。
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