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國產分光光度計采用一個可以產生多個波長的光源，通過系列分光裝置，從而產生特定波長的光源，光線透過測試的樣品后，部分光線被吸收，計算樣品的吸光值，從而轉化成樣品的濃度。樣品的吸光值與樣品的濃度成正比。
分光光度計常用光源是鎢燈，能發射出350nm-2500nm波長范圍的連續光譜，適用范圍是360nm-1000nm。現在常用光源是鹵鎢燈，其特點是發光效率大大提高，燈的使用壽命也大大延長。
紫外分光光光度計常用氫燈作為光源，其發射波長的范圍為150nm-400nm。因為玻璃吸收紫外光而石英不吸收紫外光，因而氫燈燈殼用石英制成。為了使光源穩定，分光光度計均配有穩壓裝置。
分光光度計比色皿的使用方法：
1.拿比色皿時，手指只能捏住比色皿的毛玻璃面，不要碰比色皿的透光面，以免沾污。
2.清洗比色皿時，一般先用水沖洗，再用蒸餾水洗凈。如比色皿被有機物沾污，可用鹽酸-乙醇混合洗滌液(1∶2)浸泡片刻，再用水沖洗。不能用堿溶液或氧化性強的洗滌液洗比色皿，以免損壞。也不能用毛刷清洗比色皿，以免損傷它的透光面。每次做完實驗時，應立即洗凈比色皿。
3.比色皿外壁的水用擦鏡紙或細軟的吸水紙吸干，以保護透光面。
4.測定有色溶液吸光度時，一定要用有色溶液洗比色皿內壁幾次，以免改變有色溶液的濃度。另外，在測定一系列溶液的吸光度時，通常都按由稀到濃的順序測定，以減小測量誤差。
5.在實際分析工作中，通常根據溶液濃度的不同，選用液槽厚度不同的比色皿，使溶液的吸光度控制在0.2-0.7。
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