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談談LB培養基的性能測試

來源:北京索萊寶科技有限公司   2020年12月12日 14:45  
  今天我給大家講講LB培養基的性能測試:
 
  1、外觀控制
 
  制備好的LB培養基應有相應的顏色,一般的培養基應澄清、無渾濁、無沉淀。使用前應檢查培養基的顏色是否發生變化,是否蒸發/脫水。
 
  2、污染控制
 
  從每批制備好的LB培養基中選取部分進行污染測試(空白試驗),確定無微生物生長方可使用。
 
  3、性能測試
 
  (1)測試菌株選擇:測試菌株是具有其代表種的穩定特性并能有效證明實驗室特定培養基z佳性能的一套菌株,應來自/國家標準菌種保藏中心ATCC標準菌株或其他有證書的菌株。
 
  (2)定量測試方法:改良Miles-Misra法。測試菌株過夜培養物10倍遞增稀釋;測試平板和參照平板劃分為4個區域并標記;從z高稀釋度開始,分別滴一滴稀釋液于試驗平板和對照平板標記好的區域;將稀釋液涂滿整個1/4區域,37°C培養18小時;對易計數的區域計數,按公式計算生長率(生長率=待測培養基平板上得到的菌落總數/參考培養基平板上獲得的菌落總數)。非選擇性培養基上目標菌的生長率應不低于0.7,該類培養基應易于目標菌生長;選擇性培養基上目標菌的生長率應不低于0.1 。
 
  (3)半定量測試方法:改進的劃線法接種法。平板分ABCD四區,共劃16條線,平行線大概相隔0.5cm,每條有菌落生長的劃線記作1分,每個僅一半的線有菌落生長記作0.5分,沒有菌落生長或生長量少于劃線的一半記作0分,分數加起來得到生長指數G。目標菌在培養基上應呈現典型的生長,而非目標菌的生長應部分或*被抑制,目標菌的生長指數G大于6時,培養基可接受 。
 
  (4)定性測試方法 :平板接種觀察法。用接種環取測試菌培養物,在測試培養基表面劃平行直線。按標準中規定的培養時間和溫度對接種后的平板進行培養,目標菌應呈現良好生長,并有典型的菌落外觀、大小和形態,非目標菌應是微弱生長或無生長 。

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