Elisa試劑盒技術(shù)可以充分利用單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)
ELISA試劑盒是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ),將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對(duì)底物的催化作用相結(jié)合起來(lái)的一種敏感性很高的試驗(yàn)技術(shù)。免疫酶技術(shù)是將酶標(biāo)記在抗體/抗原分子上,形成酶標(biāo)抗體/酶標(biāo)抗原,稱為酶結(jié)合物。該酶結(jié)合物的酶在免疫反應(yīng)后,作用于底物使之呈色,根據(jù)顏色的有無(wú)和深淺,定位或定量抗原/抗體。
ELISA試劑盒是免疫酶技術(shù)的一種,其特點(diǎn)是利用聚苯乙烯微量反應(yīng)板(或球)吸附抗原/抗體,使之固相化,免疫反應(yīng)和酶促反應(yīng)都在其中進(jìn)行。在每次反應(yīng)后都要反復(fù)洗滌,這既保證了反應(yīng)的定量關(guān)系,也避免了末反應(yīng)的游離抗體/抗原的分離步驟。在ELISA法中。酶促反應(yīng)只進(jìn)行一次,而抗原、抗體的免疫反應(yīng)可進(jìn)行一次或數(shù)次,即可用二抗(抗抗體)、三抗再次進(jìn)行免疫反應(yīng)。
Elisa試劑盒技術(shù)可以充分利用單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn),并能利用某些非免疫反應(yīng)試劑(如SPA、凝集素等)的作用,發(fā)展成為許多新方法。此外,發(fā)展Elisa技術(shù)還可以從酶及其底物兩方面著手。這是因?yàn)椋河糜贓lisa技術(shù)的酶其種類遠(yuǎn)遠(yuǎn)多于可用作RIA檢測(cè)指示劑的放射性同位素。
生物界的酶多種多樣,有希望開發(fā)很多類型的酶用于試劑盒,并建立相應(yīng)的Elisa方法。相反,自然界的化學(xué)元素是有限的,放射性同位素的種類更加有限。第二,由于酶的多樣性,酶作用底物也有多種多樣,與此相對(duì)應(yīng)的生色源或供氫體的種類也有遠(yuǎn)大的開發(fā)和發(fā)展?jié)摿Α?br />
ELISA試劑盒比色結(jié)果:比色前應(yīng)先用潔凈的吸水紙拭干板底附著的液體,然后將板正確放入酶標(biāo)比色儀的比色架中。以軟板為載體的試驗(yàn),需先將板置于標(biāo)準(zhǔn)96孔的座架中,才可進(jìn)行比色。
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