成人做爰免费视频免费看_成人a级高清视频在线观看,成人a大片在线观看,成人a大片高清在线观看,成人av在线播放,一a一级片,一级黄 中国色 片,一级黄 色蝶 片,一级黄色 片生活片

產(chǎn)品推薦:氣相|液相|光譜|質(zhì)譜|電化學(xué)|元素分析|水分測定儀|樣品前處理|試驗機(jī)|培養(yǎng)箱


化工儀器網(wǎng)>技術(shù)中心>其他文章>正文

歡迎聯(lián)系我

有什么可以幫您? 在線咨詢

胰蛋白酶消化液對細(xì)胞的分離效果與哪些因素有關(guān)

來源:北京索萊寶科技有限公司   2020年09月23日 11:03  
  在組織細(xì)胞的體外培養(yǎng)和原代細(xì)胞培養(yǎng)中的組織細(xì)胞分散(將組織塊制備成單個細(xì)胞懸液)和傳代細(xì)胞培 養(yǎng)中,貼壁生長細(xì)胞的消化分散均要使用組織細(xì)胞消化液.胰蛋白酶消化液一共有三種,分為胰蛋白酶- EDTA消化液(不含酚紅);胰蛋白酶-EDTA消化液(含酚紅);胰蛋白酶消化液(不含酚紅),可根據(jù)客戶的需要 來選擇.
 
  其中,胰蛋白酶含量為0.25%(2.5g/L),EDTA含量為0.02%(0.2g/L).PBS為常用的不含鈣鎂的細(xì)胞培養(yǎng)用 PBS.經(jīng)無菌過濾,可直接使用.
 
  胰蛋白酶消化液對細(xì)胞的分離效果與細(xì)胞的類型、特性和瓶壁表面特性有關(guān).一般來說濃度大、溫度高( 勿高于37℃)、作用時間長,則對細(xì)胞分離能力大.但超過一定程度會損傷細(xì)胞,導(dǎo)致細(xì)胞傳代后不能貼壁 或死亡.胰酶在pH 8.0、37℃時消化能力強.溶液中的Ca2+、Mg2+和血清會降低胰酶活力,所以配制胰酶 時須用無Ca2+、Mg2+的D-Hanks液.當(dāng)消化結(jié)束時,可加入少量血清或含血清的培養(yǎng)基以終止胰酶作用.
 
  細(xì)胞傳代使用的胰酶濃度是0.25%或0.2%.用于原代細(xì)胞培養(yǎng)消化組織塊則為0.1%或0.125%.
 
  貼壁細(xì)胞:
 
  在培養(yǎng)瓶中長成致密單層后,繼續(xù)生長的空間不足,培養(yǎng)基中的營養(yǎng)成份也消耗較多,同時代謝廢物也有較 多堆積,需要分瓶培養(yǎng),擴(kuò)增、傳代.對于懸浮生長細(xì)胞和貼壁不太緊的細(xì)胞如SP2/0,293等,可直接吹散后 分瓶;而對于貼壁較緊的細(xì)胞如Hela,HepG2,CHO等,則需要以細(xì)胞消化液消化后,才能脫落和分散,擴(kuò)瓶.一 般操作過程為(以下操作均必須嚴(yán)格按無菌操作的要求進(jìn)行):
 
  將長成致密單層細(xì)胞的細(xì)胞瓶中原來的培養(yǎng)液棄去;
 
  加入胰蛋白酶-EDTA溶液,視細(xì)胞瓶的大小加入體積為2ml或更多(依培養(yǎng)器皿的大小而定),以使充分浸 潤;
 
  一般消化時間約為13分鐘,肉眼觀察瓶底由半透明(細(xì)胞單層連接成片)轉(zhuǎn)為透明、點狀(出現(xiàn)細(xì)小空 隙)時,棄去細(xì)胞消化液,并加入適量的*培養(yǎng)液終止消化,吹打分散;
 
  視實驗?zāi)康?分入多瓶繼續(xù)培養(yǎng),一般比例為一傳二到一傳四;或接種與微孔板中.
 
  胰蛋白酶消化液組織的消化:不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜.

免責(zé)聲明

  • 凡本網(wǎng)注明“來源:化工儀器網(wǎng)”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品,未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的,應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用,并注明“來源:化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者,本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責(zé)任。
  • 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來源(非化工儀器網(wǎng))的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網(wǎng)贊同其觀點和對其真實性負(fù)責(zé),不承擔(dān)此類作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶責(zé)任。其他媒體、網(wǎng)站或個人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時,必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來源,并自負(fù)版權(quán)等法律責(zé)任。
  • 如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問題,請在作品發(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系,否則視為放棄相關(guān)權(quán)利。
企業(yè)未開通此功能
詳詢客服 : 0571-87858618
主站蜘蛛池模板: 国产毛片又爽又大A片| 国产欧美日韩国产欧美日韩| 6色成人| 日韩黄色av一级片| 强壮公次次弄得女人高潮A片小说| 少妇高潮呻吟A片免费看| 亚洲 另类 自拍 小说 图片| 年轻的母亲理论片| 美女岔开腿露出粉嫩花苞| 国产日韩欧美一级| 99久久国产露脸精品竹菊传媒| 中文字幕 日韩 有码| 久久五月丁香激情综合| WWW午夜调情| 成人网站在线进入爽爽爽| 韩国三级年轻的母亲| 色欲AV久久人妻蜜臀绯色| 久久久中文字幕人妻一区| 秋秋影视午夜福利高清| 吉吉影音成 人影院6655| 内射极品少妇一区二区AV| 哪里能看毛片| 亚洲成a人v欧美综合天堂,| 无码AV一级毛片在线播放| 久久久久久久国产| 夫妇交换做爰5| 国产欧美成人一区二区A片| 国产日本韩国欧美三级av| 狂野欧美激情性XXXX在线观看| 亚洲欧美色图小说| 一级特黄爽大片刺激| 亚洲中文无码永久免费| 蜜色欲多人AV久久无码| 亚洲精品免费视频| 亚洲成人香蕉网| 欧美又色又爽又黄的A片18禁| 洲精品无码高潮喷水A片| 性色AV性色生活片| 观看黄色电影| 免费一区二区三区在线| 日本三级欧美三级高潮365|