成人做爰免费视频免费看_成人a级高清视频在线观看,成人a大片在线观看,成人a大片高清在线观看,成人av在线播放,一a一级片,一级黄 中国色 片,一级黄 色蝶 片,一级黄色 片生活片

產品推薦:氣相|液相|光譜|質譜|電化學|元素分析|水分測定儀|樣品前處理|試驗機|培養箱


化工儀器網>技術中心>其他文章>正文

歡迎聯系我

有什么可以幫您? 在線咨詢

胰蛋白酶消化液對細胞的分離效果與哪些因素有關

來源:北京索萊寶科技有限公司   2020年09月23日 11:03  
  在組織細胞的體外培養和原代細胞培養中的組織細胞分散(將組織塊制備成單個細胞懸液)和傳代細胞培 養中,貼壁生長細胞的消化分散均要使用組織細胞消化液.胰蛋白酶消化液一共有三種,分為胰蛋白酶- EDTA消化液(不含酚紅);胰蛋白酶-EDTA消化液(含酚紅);胰蛋白酶消化液(不含酚紅),可根據客戶的需要 來選擇.
 
  其中,胰蛋白酶含量為0.25%(2.5g/L),EDTA含量為0.02%(0.2g/L).PBS為常用的不含鈣鎂的細胞培養用 PBS.經無菌過濾,可直接使用.
 
  胰蛋白酶消化液對細胞的分離效果與細胞的類型、特性和瓶壁表面特性有關.一般來說濃度大、溫度高( 勿高于37℃)、作用時間長,則對細胞分離能力大.但超過一定程度會損傷細胞,導致細胞傳代后不能貼壁 或死亡.胰酶在pH 8.0、37℃時消化能力強.溶液中的Ca2+、Mg2+和血清會降低胰酶活力,所以配制胰酶 時須用無Ca2+、Mg2+的D-Hanks液.當消化結束時,可加入少量血清或含血清的培養基以終止胰酶作用.
 
  細胞傳代使用的胰酶濃度是0.25%或0.2%.用于原代細胞培養消化組織塊則為0.1%或0.125%.
 
  貼壁細胞:
 
  在培養瓶中長成致密單層后,繼續生長的空間不足,培養基中的營養成份也消耗較多,同時代謝廢物也有較 多堆積,需要分瓶培養,擴增、傳代.對于懸浮生長細胞和貼壁不太緊的細胞如SP2/0,293等,可直接吹散后 分瓶;而對于貼壁較緊的細胞如Hela,HepG2,CHO等,則需要以細胞消化液消化后,才能脫落和分散,擴瓶.一 般操作過程為(以下操作均必須嚴格按無菌操作的要求進行):
 
  將長成致密單層細胞的細胞瓶中原來的培養液棄去;
 
  加入胰蛋白酶-EDTA溶液,視細胞瓶的大小加入體積為2ml或更多(依培養器皿的大小而定),以使充分浸 潤;
 
  一般消化時間約為13分鐘,肉眼觀察瓶底由半透明(細胞單層連接成片)轉為透明、點狀(出現細小空 隙)時,棄去細胞消化液,并加入適量的*培養液終止消化,吹打分散;
 
  視實驗目的,分入多瓶繼續培養,一般比例為一傳二到一傳四;或接種與微孔板中.
 
  胰蛋白酶消化液組織的消化:不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜.

免責聲明

  • 凡本網注明“來源:化工儀器網”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網絡有限公司-化工儀器網合法擁有版權或有權使用的作品,未經本網授權不得轉載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經本網授權使用作品的,應在授權范圍內使用,并注明“來源:化工儀器網”。違反上述聲明者,本網將追究其相關法律責任。
  • 本網轉載并注明自其他來源(非化工儀器網)的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網贊同其觀點和對其真實性負責,不承擔此類作品侵權行為的直接責任及連帶責任。其他媒體、網站或個人從本網轉載時,必須保留本網注明的作品第一來源,并自負版權等法律責任。
  • 如涉及作品內容、版權等問題,請在作品發表之日起一周內與本網聯系,否則視為放棄相關權利。
企業未開通此功能
詳詢客服 : 0571-87858618
主站蜘蛛池模板: 国产第一视频在线观看| 巨黄的长篇肉辣文小说| 日韩欧美精品一区二区三区| 欧美日韩1区| 欧美精品国产亚洲| 男人把女人桶的很爽视频| 中文字幕麻豆剧场日韩| 美女裸身照(无内衣)动态图| 小SAO货大JI巴CAO死你H| 午夜福利国产在线观看1| 99国产精品99久久久久| 日韩美女乱淫试看屁视频网站| 久久久精品国产免费A片胖妇女| 综合激情五月丁香久久| 国模大胆一区二区三区| 做爰高潮全过程免费观| 波多野衣结av| 欧美日韩亚洲一区二区三区在线观看| 亚洲.欧美.在线视频| 日韩mv欧美mv国产视频| 丰满少妇夜夜爽爽高潮水| 日本工囗漫画H无遮挡全彩| 两个吃奶一个添下面视频| 欧美日韩国产一级大片| 日本在线播放一区| 成熟人妻AV无码专区A片麻豆| 中文字幕少妇人妻| 精品人妻中文av一区二区| 日韩欧美国产一区二区粉嫩| 老赵揉着粉嫩的双乳| 粉嫩性色一区二区三区AV| 美女露着奶头光胸光屁屁动态图| 中文字幕亚洲欧美另类| 欧美精品在线播放视频| 好猛好紧好硬使劲好大男男| 久久久久久久国产精品电影| 日韩亚洲人成在线| 国产精品亚洲精品久久国语| 国产精品麻豆入口92| 久久国产精品99久久久久久老狼| 97se亚洲综合自在线尤物|