透射電鏡制備注意事項(細胞)
1、細胞數(shù)量: > 1*10的6次方;
2、消化細胞時要注意不要過度,及時用含血清的培養(yǎng)液終止消化;
3、終止消化后,預冷的PBS (pH 7.4 )洗細胞1-2次離心(1500rpm, 5min)棄上清(細胞收集在1.5ml的EP管中) ;
4、加入1mL 2.5%戊二醛溶液(需用PBS配制該溶液),可用吸管輕輕吹散細胞,使細胞懸浮于固定液中;
5、4度固定過夜后寄出 (寄送時加冰袋,并用2.5%戊二醛溶液將EP管中剩余空間充滿)。
腎臟組織樣本制備步驟:
1、迅速取材;2、PBS漂洗2次,切成小塊(米粒大小);3、快速放入2.5%戊二醛固定液中,4度固定過夜;4、固定液將整個容器里面的空間都充滿,封口膜封口;5、多加冰袋運輸。
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