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木瓜蛋白酶 Papain
細(xì)胞分離/免疫化學(xué) Cell Isolation/Immunochemistry
Worthington木瓜蛋白酶由番木瓜乳液提純而來(lái)。木瓜蛋白酶是一種低特異性的蛋白水解酶，比胰蛋白酶的蛋白底物更廣泛。在組織離解中木瓜蛋白酶比其他蛋白酶更有效并對(duì)蛋白的損害較小，更有效的蛋白酶。
Huettner and Baughman [J. Neuroscience, 6, 3044 （1986）] 用木瓜蛋白酶高收益的獲得了形態(tài)完整、可傳的代新生大鼠皮層神經(jīng)元，這些基于我們的我們的木瓜蛋白酶分解系統(tǒng)。代碼：PDS。
Worthington還生產(chǎn)了廣泛使用的木瓜蛋白酶結(jié)晶凍干制劑，此產(chǎn)品（代碼：PAPL）可代替水混懸液用于免疫化學(xué)和細(xì)胞分離。它提供了方便，穩(wěn)定和多樣性的產(chǎn)品，隨凍干粉液體還附帶保持酶活力的液體制劑。
| 產(chǎn)品說明 | 活性 | 代碼 | 目錄號(hào) | 規(guī)格 |
| 懸浮，2X結(jié)晶，0.22um濾膜過濾 懸浮于pH值4.5，0.05 M的醋酸鈉溶液。木瓜蛋白酶使用前應(yīng)被充分激活，在激活的緩沖液（1.1mM EDTA, 0.067mM巰基乙醇和5.5mM的半胱氨酸鹽酸）孵育30min。2-8°C儲(chǔ)存 | 激活后 ≥ 20 U 每毫克蛋白 | PAP* | LS003124 LS003126 LS003127 LS003128 | 25 mg 100mg 1g Bulk |
| 凍干粉 以含有2倍木瓜蛋白酶結(jié)晶的醋酸鈉溶液制備。建議在使用前如上所述充分激活。2-8°C儲(chǔ)存 | 激活后 ≥ 15 U 每毫克蛋白 | PAPL | LS003118 LS003119 LS003120 LS003122 | 25 mg 100mg 1g Bulk |
| 木瓜蛋白酶 管形瓶。PDS試劑盒組份 木瓜含有L -半胱氨酸和EDTA，每包5瓶一次性使用100單位的木瓜蛋白酶。產(chǎn)品經(jīng)0.22um濾膜過濾并于滅菌瓶?jī)龈伞Ｃ啃∑坑?ml EBSS重溶， 每毫升含20單位木瓜蛋白酶，1mM L-半胱氨酸與0.5mM EDTA。為保證木瓜蛋白酶充分溶解及其酶活性，重溶需簡(jiǎn)短孵育。 | 激活后 ≥ 100U 每毫克蛋白 | PAP2 | LK003176 LK003178 | 1Vl 5Vl |
注：標(biāo) * 需要特殊運(yùn)輸
木瓜蛋白酶分子量為23KD和適pH值范圍為6.0-7.0。木瓜蛋白酶以酶原形式存在，結(jié)晶的木瓜蛋白酶沒有活性，被弱還原劑如半胱氨酸或氰化物激活后才具活性。此外，木瓜蛋白酶是一種酯酶。
木瓜蛋白酶作用亮氨酸甲酯產(chǎn)生不溶性多聚亮氨酸肽。木瓜蛋白酶被半胱氨酸、硫化物和亞硫酸鹽激活。重金屬螯合劑如EDTA存在時(shí)，木瓜蛋白酶的作用也加強(qiáng)。N-溴代丁二酰亞胺增強(qiáng)木瓜蛋白酶的活性。巰基試劑，重金屬和羰基試劑抑制木瓜蛋白酶的活性。木瓜蛋白酶可由γ-射線照射水產(chǎn)生的過氧化氫滅活，氫硫基被次磺酸氧化。木瓜蛋白酶含量用苯甲酰-L-精氨酸乙酯（BAEE）水解產(chǎn)生的酸滴定測(cè)定。木瓜蛋白酶在使用前須充分激活。穩(wěn)定劑是EDTA，半胱氨酸和巰基乙醇二聚體。
穩(wěn)定性：2-8°C儲(chǔ)存，穩(wěn)定6-12個(gè)月
儲(chǔ)存：2-8°C，勿凍結(jié)液體制劑。
單位定義：在25°C，pH值6.2 1u木瓜蛋白酶激活后每分鐘水解 1 uM 苯甲酰-L-精氨酸乙酯，激活的緩沖液含1.1mM EDTA, 0.067mM巰基乙醇和5.5mM的半胱氨酸鹽酸。在緩沖液中孵育30min，木瓜蛋白酶被*激活。
技術(shù)說明
木瓜蛋白酶使用前應(yīng)被激活，確保高酶活力。激活的緩沖液含1.1mM EDTA, 0.067mM巰基乙醇和5.5mM的半胱氨酸鹽酸。在緩沖液中孵育30min，木瓜蛋白酶被*激活。
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