貨號:YJS2224 規格:50管/24樣
土壤脲酶檢測試劑盒說明書
可見分光光度法
產品簡介:
S-UE能夠水解尿素,產生氨和碳酸。土壤脲酶活性與土壤的微生物數量、有機物質含量、全氮和*氮含量呈正相關。土壤脲酶活性反應了土壤的氮素狀況。
利用靛酚藍比色法測定脲酶水解尿素產生的NH3-N。
試驗中所需的儀器和試劑:
可見分光光度計、水浴鍋、可調式移液器、1ml玻璃比色皿、研缽、冰、甲苯(不允許快遞)和蒸餾水。
產品內容:
試劑一:甲苯10ml×1瓶,4℃保存;(自備)
試劑二:粉劑×1瓶,臨用前加入20ml蒸餾水,充分溶解待用,4℃保存;
試劑三:液體65ml×1瓶,4℃保存;
試劑四A液:液體1ml×1瓶,4℃保存;試劑四B液:液體4ml×1瓶,4℃保存;臨用前將A液倒入B液中混合,待用;4℃保存一周
試劑五:液體5ml×1瓶,4℃保存;
操作步驟:
- 培養
試劑名稱 | 測定管 | 對照管 |
風干土樣(g) | 0.25 | 0.25 |
試劑一(μl) | 125 | 125 |
振蕩混勻,使土樣全部濕潤,室溫放置15min | ||
試劑二(μl) | 625 |
|
蒸餾水(μl) |
| 625 |
試劑三(μl) | 1250 | 1250 |
混勻,放入37℃水浴培養24h后,10000g常溫離心10min,取上清液。 |
- 將培養結束的上清液稀釋10倍(取0.1ml上清液,加入0.9ml蒸餾水)。
3、測氨量
| 測定管 | 對照管 |
稀釋后的上清液(μl) | 400 | 400 |
試劑四(μl) | 80 | 80 |
試劑五(μl) | 60 | 60 |
充分混勻,室溫放置20min | ||
蒸餾水(μl) | 460 | 460 |
混勻,578nm處蒸餾水調零,測A值,ΔA=A測定管-A對照管。每個測定管設一個對照管。
脲酶活力的計算:
標準條件下測定的回歸方程為y=0.0915x+0.0373;x為標準品濃度(μg/ml),y為吸光值。
單位的定義:每天每g土樣中產生1μgNH3-N定義為一個酶活力單位。
脲酶活力(U/g 土樣)=(ΔA-0.0373)÷0.0915×10×V反總÷W÷T=874×(ΔA-0.0373)
10:稀釋倍數;T:反應時間,1d;V反總:反應體系總體積:2ml;W:樣本質量,0.25g。
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