在做各種樣品(藥品、醫(yī)療器械、化妝品、保健食品)的微生物檢驗(yàn)中,經(jīng)常會(huì)看到質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中會(huì)涉及CFU/g或CFU/ml。還有一些標(biāo)準(zhǔn)中單位是個(gè)/g或者個(gè)/ml。這些到底有什么差別,我們要從CFU的基本定義開始。
CFU:A colony-forming unit(CFU,cfu,CFu)is a unit used in microbiology to estimate the number of viable bacteria or fungal cells in a sample.
翻譯過(guò)來(lái)就是:菌落形成單位是指微生物學(xué)中用于估算樣品中活的細(xì)菌或者真菌數(shù)量的單位。
直觀來(lái)說(shuō),小小的一個(gè)微生物不是肉眼可見的,必須借助高倍顯微鏡甚至染色后才能清楚觀察到。CFU是通過(guò)平板培養(yǎng)基上肉眼可見的菌落數(shù)來(lái)反推樣品中微生物數(shù)量的一種方式,這期間發(fā)生了分散、稀釋、培養(yǎng)等等過(guò)程。
首先,CFU是菌落形成單位,數(shù)據(jù)不是直接反映樣品中的微生物數(shù)量。是一種認(rèn)可的估算。估算成功的前提是平板涂布或者接種之前微生物活細(xì)胞分散均勻。而一些鏈球菌、球菌等天生就不能單細(xì)胞分散均勻。另外一個(gè)因素是稀釋倍數(shù)合理,有些樣品的微生物含量很高,要想計(jì)數(shù)必須梯度稀釋很多次,后CFU區(qū)間落在30-300之間更有效。太多太少都不合適。
其次,能夠在平板上生長(zhǎng)出來(lái)的活的微生物才會(huì)形成CFU。理論上,分散均勻的情況下,一個(gè)活細(xì)胞形成1CFU。在實(shí)際操作中,渦旋振蕩進(jìn)行混勻就會(huì)出現(xiàn)很多情況。微生物是分散程度更好了,但是有一些被振死了。 另外,微生物終能在平板培養(yǎng)基上形成菌落還與培養(yǎng)基類型、培養(yǎng)溫度及時(shí)間、接種方式、潛在微生物類型有關(guān)系。
總而言之,CFU是一種估算方法。當(dāng)出現(xiàn)CFU時(shí),就代表了已經(jīng)選擇了這種估算方式,不同的單位也代表了過(guò)程的前后。
后,來(lái)說(shuō)說(shuō)CFU的現(xiàn)實(shí)意義。舉例來(lái)說(shuō),定量菌種的菌種數(shù)量如果標(biāo)示的是“CFU”,也就代表這種定量菌種也是用培養(yǎng)基法來(lái)計(jì)數(shù)的。如果定量菌種是用流式細(xì)胞儀等其他方式計(jì)數(shù),標(biāo)示“個(gè)”更為合理。
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