植物總酚檢測試劑盒說明書
分光光度法
產品內容:
提取液:60%乙醇,自備。
試劑一:液體6mL×1 瓶,4℃保存。
試劑二:液體15mL×1 瓶,4℃保存。
產品說明:
植物酚類物質具有清除自由基,抗氧化抗衰老的作用,具有較高的營養價值和醫療保健作用而廣泛應用于化妝品、食品、醫藥等領域。
在堿性條件下,酚類物質將鎢鉬酸還原,產生藍色化合物,在760nm 處有特征吸收峰,測760nm 處的吸光值,即可得樣品總酚含量。
儀器設備(自備):
烘箱、粉碎儀、40目篩、超聲破碎儀、60%乙醇、離心機、可見分光光度計、1mL玻璃比色皿。
操作步驟:
- 總酚提取:
將樣本烘干至恒重,粉碎,過40目篩之后,稱取約0.1g,加入2.5mL提取液,用超聲提取法進行提取,超聲功率300W,破碎5秒,間歇8秒,60℃,提取30min。12000rpm,25℃,離心10min,取上清,用提取液定容至2.5mL,待測。
2、測定操作表:
| 對照管 | 測定管 |
樣本待測液(mL) | 0.05 | 0.05 |
試劑一(mL) |
| 0.25 |
混勻,室溫靜置2min | ||
試劑二(mL) | 0.25 | 0.25 |
雙蒸水(mL) | 0.7 | 0.45 |
混勻,室溫靜置10 min,雙蒸水調零,波長760nm,1mL比色皿, 測定各管吸光度值(ΔA760=A測定-A對照)。 |
計算公式:
標準曲線:y=5.615x+0.0012,R2=0.9994
總酚含量(mg/g組織)=(ΔA760-0.0012) ÷5.615×V反總÷(V樣÷V樣總×W)=8.905×(ΔA760-0.0012) ÷W
V 樣總:加入提取液體體積,2.5mL;V反總:反應總體積,1mL;V 樣:反應中樣品體,0.05mL;W:樣品質量,g。
注意事項:
- OD 值大于0.8,樣品適當稀釋再測定,注意計算公式里乘以稀釋倍數。
- 試劑一對皮膚有一定的刺激性,請操作時做好防護措施。
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實驗代做服務:
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