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Huh-7/Sorafenib人肝癌索拉非尼耐藥株|Huh-7細(xì)胞

來源:上海琛藝實(shí)業(yè)有限公司   2020年06月26日 21:04  

細(xì)胞用途 僅供科研使用:Huh-7/Sorafenib人肝癌索拉非尼耐藥株|Huh-7細(xì)胞

生長(zhǎng)特性 貼壁

細(xì)胞背景 生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)

微生物及支原體檢測(cè):陰性

培養(yǎng) *培養(yǎng)基:90%RPMI-1640+10%胎牛血清+1ug/ml DDP

血清我們推薦用:

GIBCOFBS-10099-141或HYCLONEFBS-SH30084.03。

培養(yǎng)條件:37.0C  carbon dioxide(CO2),5%

細(xì)胞特性

1)來源:人

2)形態(tài):貼壁生長(zhǎng)

3)含量:>1x106 個(gè)/mL

4)污染:支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測(cè)為陰性

5)規(guī)格:T25瓶

Huh-7/Sorafenib人肝癌索拉非尼耐藥株|Huh-7細(xì)胞

細(xì)胞培養(yǎng)步驟 收到細(xì)胞后,在倒置鏡下(好是在4X物鏡)觀察整個(gè)細(xì)胞生長(zhǎng)情況。

(一)如果細(xì)胞未長(zhǎng)滿,用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超菌臺(tái)內(nèi),嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶,吸出培養(yǎng)液,換 10ml新鮮培養(yǎng)液后繼續(xù)培養(yǎng)。

(二)如果細(xì)胞已長(zhǎng)滿,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下:

1. 棄去培養(yǎng)液,用PBS(不含鈣,鎂離子)洗1-2次。

2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,倒放于37℃培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱,之后翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶10-30秒,在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量*培養(yǎng)基終止消化。 

3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加*培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出一半,分到新的培養(yǎng)瓶中。如果沒有特別說明,收到細(xì)胞后的一次傳代一般是一傳二。

注:1、觀察細(xì)胞好在低倍鏡(4或5X物鏡)下進(jìn)行,否則不能準(zhǔn)確判斷細(xì)胞的傳代密度。看細(xì)胞的形態(tài)請(qǐng)?jiān)?0X或20X物鏡下。

2、瓶中運(yùn)輸培養(yǎng)基不能重復(fù)再用,請(qǐng)換用加雙抗的新培養(yǎng)基,細(xì)胞凍存后,培養(yǎng)基中可不加任何抗生素。

3、有些細(xì)胞貼壁不牢,如發(fā)現(xiàn)貼壁細(xì)胞有脫落,可離心吹打后接種到新瓶?jī)?nèi)。

4、收到細(xì)胞后,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染,請(qǐng)及時(shí)與我們聯(lián)系。..

 

保存 凍存條件:90%*培養(yǎng)液+10%DMSO 

保存條件:液氮存儲(chǔ)

常見問題及解決方案 1.培養(yǎng)瓶有破裂,培養(yǎng)液有漏液:細(xì)胞極大可能會(huì)污染,所以我們會(huì)及時(shí)安排幫老師解決。

2.收到細(xì)胞后盡快更換為含 10%血清的新鮮培養(yǎng)基,如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶培養(yǎng)基,請(qǐng)?jiān)谠颗囵B(yǎng)基中額外添加 10%的血清(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時(shí)間長(zhǎng)不宜超過 72 小時(shí))

3.細(xì)胞漂浮:培養(yǎng)瓶不開封,瓶口酒精擦拭后平躺放置在培養(yǎng)箱。1-2小時(shí)后觀察,如細(xì)胞大部分又貼回瓶底,表明細(xì)胞活力正常,剩余漂浮的細(xì)胞可以去掉,留8-10ml培養(yǎng)液培養(yǎng)觀察,細(xì)胞生長(zhǎng)至匯合度80%,進(jìn)行消化傳代;如細(xì)胞還是不貼壁,將細(xì)胞離心收集轉(zhuǎn)到新培養(yǎng)瓶,原培養(yǎng)瓶加部分培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng),中間注意觀察,我們的技術(shù)人員會(huì)一直跟蹤指導(dǎo),直到問題解決。

A549/L人肺癌耐奧沙利鉑細(xì)胞株
SMMC7721/L人肝癌奧沙利鉑耐藥株
BEL/L人肝癌耐奧沙利鉑細(xì)胞株
HCT8/L人結(jié)腸癌耐奧沙利鉑細(xì)胞株
lovo/L人結(jié)腸癌耐奧沙利鉑細(xì)胞株
hct116/L人結(jié)腸癌耐奧沙利鉑細(xì)胞株
  
紫杉醇(T)
A549/Taxol 人肺癌紫杉醇耐藥株 
MCF7/Taxol人乳腺癌紫杉醇耐藥株 
HCT8/Taxol人結(jié)腸癌紫杉醇耐藥株 
HO-8910/Taxol人卵巢癌紫杉醇耐藥株 
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L1210/Taxol小鼠白血病紫杉醇耐藥株 
  
  
阿霉素(Adr)
A549/Adr人肺癌阿霉素耐藥株
BIU-87/Adr人膀胱癌阿霉素耐藥株
SGC7901/Adr人胃癌阿霉素耐藥株
BEL/Adr人肝癌阿霉素耐藥株
MCF7/Adr人乳腺癌阿霉素耐藥株
lovo/Adr人結(jié)腸癌阿霉素耐藥株
HO-8910/ADR人卵巢癌阿霉素耐藥株
A2780/Adr人卵巢癌阿霉素耐藥株
K562/Adr人白血病阿霉素耐藥株
HL-60/Adr人白血病阿霉素耐藥株
  
長(zhǎng)春新堿(V)
HCT8/V人結(jié)腸癌長(zhǎng)春新堿耐藥株
A2780/V人卵巢癌長(zhǎng)春新堿耐藥株
SGC7901/V人胃癌長(zhǎng)春新堿耐藥株
  
吉非替尼
A549/吉非替尼耐藥株人肺癌吉非替尼耐藥株
  
索拉非尼
Huh-7/Sorafenib人肝癌索拉非尼耐藥株
SMMC-7721/Sorafenib人肝癌索拉非尼耐藥株

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