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NIH3T3小鼠胚胎成纖維細(xì)胞GFP綠色標(biāo)記細(xì)胞 含STR鑒定

來源:上海琛藝實(shí)業(yè)有限公司   2020年06月24日 21:32  

NIH3T3小鼠胚胎成纖維細(xì)胞GFP綠色標(biāo)記細(xì)胞 含STR鑒定

包裝:內(nèi)層無菌自封袋;防壓泡沫盒;外層防壓保溫氣泡袋;附帶中文指導(dǎo)說明書
特點(diǎn):細(xì)胞代數(shù)為4代以內(nèi),細(xì)胞耐藥倍數(shù)8倍以上;
規(guī)格②:70%密度的25cm2培養(yǎng)瓶的細(xì)胞一瓶規(guī)格①:一代凍存管細(xì)胞,干冰運(yùn)輸,貨期2-3天

細(xì)胞來源:ATCC、sciencell、ICLC等
貨期:1-2周

運(yùn)輸方式:快遞運(yùn)輸(空運(yùn)可抵達(dá)的目的地優(yōu)先派發(fā)聯(lián)邦空運(yùn))

售后:規(guī)格①收到細(xì)胞一個(gè)月內(nèi),規(guī)格②收到細(xì)胞后14天內(nèi),如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有質(zhì)量問題(如污染,死亡,快遞運(yùn)輸?shù)仍颍r(shí),應(yīng)出具書面質(zhì)量問題報(bào)告并及時(shí)傳真或致銷售人員,我們將盡快為您解決!


以下細(xì)胞處理方法及細(xì)胞說明書僅供參考,具體操作還需要根據(jù)到貨時(shí)細(xì)胞密度,細(xì)胞生長狀態(tài)等具體情況,酌情處理,如需要更詳細(xì)技術(shù)指導(dǎo),請(qǐng)及時(shí)或郵件。上海琛藝為您提供服務(wù)。。。。

NIH3T3小鼠胚胎成纖維細(xì)胞GFP綠色標(biāo)記細(xì)胞 含STR鑒定

 一、售前
         上海琛藝實(shí)業(yè)專業(yè)為國內(nèi)科研提供高品質(zhì)細(xì)胞和優(yōu)質(zhì)服務(wù),QC檢測(cè)合格后發(fā)貨保證細(xì)胞狀態(tài)良好,發(fā)貨前保證質(zhì)量。
 
二、售后
         收到細(xì)胞7天內(nèi)出現(xiàn)狀態(tài)不佳等情況請(qǐng)及時(shí)反饋,會(huì)有技術(shù)同步指導(dǎo)操作協(xié)助解決,如仍未養(yǎng)活免費(fèi)重發(fā)。建議及時(shí)保種,有備無患!
 
三、細(xì)胞生長條件:
培養(yǎng)條件   
GIBCO(培養(yǎng)基90% +10%FBS)
溫度                   
                    37℃
空氣條件  
5% CO2,,95% AIR
傳代方法
1:2傳代,2~3天換液
凍存條件
90%FBS+10%DMSO
 
四、細(xì)胞收到后處理
    細(xì)胞在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿*培養(yǎng)液并封好瓶口是細(xì)胞運(yùn)輸?shù)暮棉k法。收到細(xì)胞回到自己的實(shí)驗(yàn)室后,先打開外包裝,用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超凈臺(tái)內(nèi),嚴(yán)格無菌操作。鏡下觀察:未超過80%匯合度時(shí),可將瓶裝的*培養(yǎng)液移入廢液缸中,原瓶(T25瓶)保留6-8ml*培養(yǎng)液,懸浮細(xì)胞需離心處理,放入37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng);超過80%匯合度時(shí),根據(jù)情況傳代或者凍存,具體操作見細(xì)胞培養(yǎng)步驟。

一.懸浮細(xì)胞    

1. 接收到細(xì)胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養(yǎng)瓶外部。
2. 肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X ,200X 各一張)。
3. 嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4. 將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒)。
5. 1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。 換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和新鮮培養(yǎng)基,37℃,5%CO2  培養(yǎng)。

二.貼壁細(xì)胞  
客戶接收到細(xì)胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養(yǎng)瓶外部。
肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X ,200X 各一張)。
顯微鏡觀察細(xì)胞,當(dāng)細(xì)胞融匯至80%左右(可以傳代的情況下),細(xì)胞應(yīng)該在37度培養(yǎng)箱預(yù)溫1-2h后再做處理。如未達(dá)到細(xì)胞傳代密度,培養(yǎng)瓶應(yīng)預(yù)留一部分培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。HEC-1-B-RFP熒光標(biāo)記細(xì)胞株
將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞)。
用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面,加入適量的0.05%胰酶-EDTA消化細(xì)胞,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落,加入終止液終止。 

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