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精子冷凍保護劑

來源:青島捷世康生物科技有限公司   2020年06月24日 16:42  

產(chǎn)品簡介:

      正常精液是一種混合物,由睪丸和附睪的分泌物及懸浮其中的精子與前列腺、精囊腺和尿道球腺的分泌物混合而成,終射出的混合物是一種粘稠的液體。精子分析的方法有很多,其中可通過培養(yǎng)進行檢測。隨著生殖工程技術(shù)的興起及發(fā)展,供精人工授精(AID)已經(jīng)成為治療某些不可恢復(fù)或無法治療的男性不育癥的重要療法,其中精液冷凍是其中的重要環(huán)節(jié)。在一定的低溫條件下,以一定的時間作用于生物組織細胞,引起細胞的降溫、凝固、非損傷性結(jié)冰,使生物體內(nèi)分子運動的速度減慢、停止,從而使細胞代謝降低,處于休眠狀態(tài),達到貯存細胞的目的。

         精子冷凍保護劑主要由甘油、葡萄糖、枸櫞酸鈉、抗生素等組成,經(jīng)無菌處理,其基本原理是在細胞冷凍過程中隨著溫度不斷下降,細胞外液中作為各種電解質(zhì)溶劑的水分首先形成細小的顆粒狀冰晶,導(dǎo)致細胞外水份減少,電解質(zhì)濃度增加,細胞外液滲透壓升高,使細胞內(nèi)外液滲透壓失去平衡,水分將從滲透壓低的內(nèi)液通過細胞膜流向滲透壓高的外液,于是細胞自身脫水皺縮,用冷凍過程中產(chǎn)生的滲透壓的梯度使細胞皺縮,而不損傷細胞。該試劑僅用于科研領(lǐng)域,不適用于臨床診斷或其他用途。

自備材料:

1、 程序冷凍儀

2、 水浴箱、恒溫培養(yǎng)箱

3、 冰箱、液氮罐、冷凍管

4、 1ml 注射器

操作步驟(僅供參考)

()類精液快速冷凍步驟

1、精液取出后,在 37℃的水浴箱中液化。

2、精液液化后按照 WHO 的標(biāo)準(zhǔn)進行常規(guī)分析,包括精液量、顏色、氣味、PH 值、液化

狀況、精子密度、活動率、圓細胞數(shù)等,并做好相關(guān)記錄。

3、提前將冷凍保護劑復(fù)溫至室溫。

4、將精液與冷凍保護劑按 1:1 的比例混勻,并分裝于冷凍管中,冷凍管做好標(biāo)記。

5、將冷凍管置入 4℃冰箱 15min。

6、將冷凍管置入-80℃液氮蒸氣中 15min。

7、將冷凍管投入液氮中凍存。

(二)人類精液程序冷凍步驟

1、精液取出后,在 37℃的水浴箱中液化。

2、精液液化后按照 WHO 的標(biāo)準(zhǔn)進行常規(guī)分析,包括精液量、顏色、氣味、PH 值、液化

狀況、精子密度、活動率、圓細胞數(shù)等,并做好相關(guān)記錄。

3、提前將冷凍保護劑復(fù)溫至室溫。

4、將精液與冷凍保護劑按 1:1 的比例混勻,并分裝于冷凍管中,冷凍管做好標(biāo)記。

5、將冷凍管置于程序冷凍儀中,開始程序冷凍。冷凍程序如下:

1)開始溫度:20℃平衡 5-10min;2)20℃→0℃,冷凍速率-1℃/min;3)0℃→-30℃,

冷凍速率-6℃/min;4)-30℃→-80℃,冷凍速率-30℃/min。

6、從程序冷凍儀中取出冷凍管,投入液氮中凍存。

(三)復(fù)蘇步驟

冷凍過程中精子發(fā)生的一系列變化也會表現(xiàn)在解凍時的反向順序中,而快速復(fù)溫

(100℃/min 左右)可避免精液在溶解前的再次形冰晶成,具體步驟為:將貯存于液氮中的精

液冷凍管取出,快速放入 37℃的水浴箱中復(fù)溫即可。

注意事項:

1、 注意無菌操作,盡量避免污染。

2、 影響精液冷凍貯存的因素主要有:冷凍程序、冷凍保護劑、復(fù)蘇速率、貯存方式,及冷

凍前精液質(zhì)量等。

3、 人們多使用液氮來貯存精液,液氮是一種無色、無味的氣體,其沸點為-195.8℃。具

有低溫、不助燃、不自燃、不易爆炸、來源豐富的優(yōu)點。

有效期:6 個月有效。4℃保存 1 周有效。

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