現(xiàn)在的elisa試劑盒可謂魚龍混雜，難辨好壞，因?yàn)榫哂徐`敏度高、特異性強(qiáng)，操作方法簡(jiǎn)便快速、無(wú)放射性污染以及應(yīng)用范圍廣等很多優(yōu)點(diǎn)，已經(jīng)被許多的科研朋友所應(yīng)用，雖說(shuō)是操作簡(jiǎn)便快速，但是稍稍的不注意，實(shí)驗(yàn)就可能會(huì)失敗，今天，上海古朵來(lái)為您找找ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)失敗的原因究竟是什么？

操作注意：
1. 溶血標(biāo)本及混有紅細(xì)胞的血清采用ELISA法檢測(cè)易產(chǎn)生假陽(yáng)性。可能是溶血血清中含有過(guò)氧化酶物質(zhì)（紅細(xì)胞或血紅蛋白中的亞鐵血紅素），在洗滌過(guò)程中往往難以*洗脫，它可使H2O2釋放出原生態(tài)氧（O），從而催化底物四甲基聯(lián)苯胺生成可溶性的有色物質(zhì)，即顯藍(lán)色，產(chǎn)生假陽(yáng)性。所以嚴(yán)重溶血標(biāo)本禁用。

2. 標(biāo)本受細(xì)菌污染。因菌體中可能含有內(nèi)源性辣根過(guò)氧化物酶，因此，被細(xì)菌污染的標(biāo)本同溶血標(biāo)本一樣，亦可產(chǎn)生非特異性顯色而干擾測(cè)定結(jié)果。

3. 標(biāo)本保存不當(dāng)。在冰箱中保存過(guò)久的標(biāo)本，在間接法ELISA測(cè)定中會(huì)導(dǎo)致本底過(guò)深、造成假陽(yáng)性；為克服上述干擾，ELISA試劑盒測(cè)定的血清標(biāo)本宜為新鮮采集；如不能立即測(cè)定，5 d內(nèi)測(cè)定的血清標(biāo)本可存放于4℃，1周后測(cè)定的血清標(biāo)本應(yīng)低溫凍存；凍存后融解的標(biāo)本，蛋白質(zhì)局部濃縮，分布不均，應(yīng)充分混合后再測(cè)定，但混勻時(shí)應(yīng)輕柔，不可強(qiáng)烈振蕩。

塑料試管能吸附抗原物質(zhì)，樣本久置在塑料管內(nèi)會(huì)使樣本內(nèi)抗原含量下降造成假陰性。好使用真空采血管；并使用非抗凝標(biāo)本，肝素抗凝血漿會(huì)增加OD值，EDTA、酶抑制劑可抑制ELISA系統(tǒng)中辣根過(guò)氧化物酶活性。

標(biāo)本凝固不全。 在工作中，有時(shí)為了爭(zhēng)取時(shí)間快速檢測(cè)，常在血液還未開始凝固時(shí)即強(qiáng)行離心分離血清，使血清中仍殘留部分纖維蛋白原，在ELISA測(cè)定過(guò)程中可以形成肉眼可見(jiàn)的纖維蛋白塊，易造成假陽(yáng)性結(jié)果；因此血液標(biāo)本采集后必須使其充分凝固后再分離血清。

上海古朵生物科技有限公司秉承“信譽(yù)、質(zhì)量、品牌、誠(chéng)信為本"的理念，以優(yōu)良的服務(wù)質(zhì)量和實(shí)惠的價(jià)格，ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)前，請(qǐng)仔細(xì)閱讀中英文說(shuō)明書，我們提供免費(fèi)代測(cè)，實(shí)驗(yàn)過(guò)程指導(dǎo)服務(wù)，詳情咨詢上海古朵在線客服。