實驗原理
帶電質(zhì)點在電場作用下,帶正電荷的移向負(fù)極,帶負(fù)電荷的移向正極,這種現(xiàn)象稱為電泳。蛋白質(zhì)分子具有許多可解離的酸性基團(tuán)和堿性基團(tuán),在一定的pH條件下,它會解離而帶電,在某一pH下,蛋白質(zhì)分子中所帶的正電荷數(shù)恰好等于負(fù)電荷數(shù),即分子靜電荷等于零。此時蛋白質(zhì)分子在電場中不移動,溶液的這一PH值稱為該蛋白質(zhì)的等電點。
當(dāng)溶液的pH小于該蛋白質(zhì)的等電點,則蛋白質(zhì)分子會結(jié)合一部分H離子而帶正電荷,在電場中就會向負(fù)極移,反之,如果溶液的pH大于該蛋白質(zhì)的等電點,則蛋白質(zhì)分子會解離出一部分H離子而帶負(fù)電荷,在電場中就會向正極移動。
由于各蛋白質(zhì)的等電點不同,在相同的pH溶液中所帶的電荷性質(zhì)不同,電荷的數(shù)目不同,因而在電場中泳動的方向和速度也不相同,從而使混合樣品中的蛋白質(zhì)各組分得到分離。
本實驗采用的醋酸纖維薄膜電泳是以醋酸纖維薄膜為支持物。醋酸纖維薄膜對蛋白質(zhì)樣品吸附極少而無“拖尾”現(xiàn)象。
本方法快速省時、靈敏度高、樣品用量少、操作簡單,目前已廣泛用于分析檢測血漿蛋白、脂蛋白、糖蛋白、胎兒甲種球蛋白、體液、脊髓液、脫氫酶、多肽、核酸及其他生物大分子,為心血管病,肝硬化及某些癌癥鑒別診斷提供了可靠的依據(jù),因而已成為醫(yī)學(xué)和臨床檢驗的常規(guī)技術(shù)。
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