實驗原理
聚丙烯酰胺凝膠是由單體丙烯酰胺和交聯劑在加速劑過硫酸銨或核黃素的作用下聚合交聯成三維網狀結構的凝膠,以此凝膠為支持物的電泳稱為聚丙烯酰胺凝膠電泳。
聚丙烯酰胺凝膠具有下列特性:
1. 在一定濃度時,凝膠透明,有彈性,機械性能好;
2. 化學性能穩定,與被分離物不起化學反應,在很多溶劑中不溶;
3. 對PH和溫度變化較穩定;
4. 幾乎無吸附和電滲作用,只要Acr純度高,操作條件一致,則樣品分離重復性好;
5. 樣品不易擴散且用量少;
6. 凝膠孔徑可調節,根據被分離物的相對分子質量選擇合適的濃度,通過改變單體及交聯劑的濃度調節凝膠的孔徑;
7. 分辨率高。
血清蛋白在紙或醋酸纖維薄膜電泳中,只能分離出5~6條區帶,而聚丙烯酰胺電泳卻可分離出數十條區帶,因而,目前PAGE已廣泛用于科研、農、醫及臨床診斷的分析、制備,如蛋白質、酶、核酸、血清蛋白、脂蛋白的分離及病毒
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