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HUVEC-C-GFP人臍靜脈血管內(nèi)皮綠色標(biāo)記細(xì)胞 處理方法

來源:上海琛藝實(shí)業(yè)有限公司   2020年06月08日 09:14  

感恩回饋,價(jià)格實(shí)惠,物美價(jià)廉,量大從優(yōu),部分試劑買一送一。。。。。。

 

上海琛藝實(shí)業(yè)有限公司提供ATCC原代細(xì)胞,ATCC菌株代購(gòu),同時(shí)上海琛藝新增細(xì)胞庫,具有自己的研發(fā)細(xì)胞培養(yǎng)庫,上千株細(xì)胞具有STR鑒定,開春大放送,*,同時(shí)還有好禮相送,具體歡迎咨詢我們銷售人員。。。。

HUVEC-C-GFP人臍靜脈血管內(nèi)皮綠色標(biāo)記細(xì)胞 處理方法 已通過STR鑒定

 

【細(xì)胞傳代】:1:3 傳代

 

【細(xì)胞活力】:90%(Viability by Trypan Blue Exclusion)

 

【細(xì)胞檢測(cè)】:細(xì)胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌

 

【細(xì)胞凍存】:液氮凍存(基礎(chǔ)培養(yǎng)基+10%DMSO+20%FBS)

 

【細(xì)胞運(yùn)輸】:干冰運(yùn)輸(1 Vial)或活細(xì)胞運(yùn)輸(T-25 flasks)

 

詳細(xì)背景: 這株細(xì)胞的細(xì)胞骨架染色突出呈現(xiàn)肌動(dòng)蛋白,在細(xì)胞質(zhì)中有豐富的平行微絲。有報(bào)道稱在1uM血管緊張素II存在下,它們會(huì)收縮。細(xì)胞在軟瓊脂中形成克隆,SV40大T抗原陽性。

 

細(xì)胞來源: 細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)內(nèi)外著名大學(xué)建系

 

"購(gòu)買細(xì)胞注意事項(xiàng):

 

1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。

 

2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等。

 

3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,OSKMZ-1小鼠誘導(dǎo)型多能干細(xì)胞| OSKMZ-1動(dòng)物

 

顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落,將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)過夜,隔天再取出觀察。此時(shí)多數(shù)細(xì)胞均會(huì)貼壁,若細(xì)胞仍不能貼壁請(qǐng)用臺(tái)盼藍(lán)染色測(cè)定細(xì)胞活力,如果證實(shí)細(xì)胞活力正常,請(qǐng)將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無活力,請(qǐng)拍下照片及時(shí)和我們聯(lián)系,信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M(fèi)寄送一次。

 

4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和公司技術(shù)部溝通交流。

 

規(guī)格: 復(fù)蘇T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存1ml凍存管(兩支)

 

細(xì)胞規(guī)格: 1*10(5)/ml——1*10(6)/ml

 

HUVEC-C-GFP人臍靜脈血管內(nèi)皮綠色標(biāo)記細(xì)胞 處理方法 已通過STR鑒定

培養(yǎng)步驟:

1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加4-6mL*培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中),培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

 

1、對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:

1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。

2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的*培養(yǎng)基終止消化。

3.輕輕吹打細(xì)胞,*脫落后吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。

PS:若客戶收到2ml小管細(xì)胞,收到細(xì)胞后,用75%酒精噴灑整個(gè)管子消毒后放到超凈臺(tái)或安全柜內(nèi),嚴(yán)格無菌操作;將小管細(xì)胞轉(zhuǎn)移至T25培養(yǎng)瓶或6cm培養(yǎng)皿,加入5ml左右*培養(yǎng)基混勻,放入培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)后查看細(xì)胞密度:若密度未超過80%,換液繼續(xù)培養(yǎng),視情況傳代或者凍存。若密度超過80%,可直接進(jìn)行傳代(方法同上)。

2、對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:

方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

 

3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,進(jìn)行離心收集,1000RPM條件下離心8-10分鐘,去除上清,按凍存數(shù)量加入血清及DMSO,凍存比例為90%FBS+10%DMSO。

 

PS:若客戶收到2ml小管細(xì)胞,收到細(xì)胞后,用75%酒精噴灑整個(gè)管子消毒后放到超凈臺(tái)或安全柜內(nèi),嚴(yán)格無菌操作;將小管細(xì)胞轉(zhuǎn)移至T25培養(yǎng)瓶或6cm培養(yǎng)皿,加入5ml左右*培養(yǎng)基混勻,放入培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)后查看細(xì)胞密度:若密度未超過80%,換液繼續(xù)培養(yǎng),視情況傳代或者凍存。若密度超過80%,可直接進(jìn)行傳代(方法同上)。

 

上海琛藝是一家專業(yè)從事細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)產(chǎn)品的公司,擁有獨(dú)立細(xì)胞房(可隨時(shí)約定參觀),供應(yīng)胎牛血清,STR鑒定細(xì)胞,感受態(tài)細(xì)胞等,專業(yè),專注,性價(jià)比高,是您Shou選之家。

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