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NCI-H2030-GFP人肺癌綠色標記細胞 培養步驟

來源:上海琛藝實業有限公司   2020年06月07日 17:01  

NCI-H2030-GFP人肺癌綠色標記細胞 培養步驟 已通過STR鑒定

【背景資料】 見細胞說明書
【產品來源】 細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國內外著名大學建系
"公司提供貼壁、半貼壁、懸浮、半懸浮、貼壁與懸浮混合等細胞特性,一般細胞培養PBS量是10%,如果出現細胞狀態不良情況,可以提高PBS量到15%,SHEE人永生化食管上皮細胞待細胞穩定后,調回PBS量10%,對于初次實驗者,一般細胞培養,都需要加入雙抗防止細胞污染,細胞匯合度達到90%,我們開始寄送,這樣可以保持細胞收到時,良好的細胞活力。
一、售前
         上海琛藝實業專業為國內科研提供高品質細胞和優質服務,QC檢測合格后發貨保證細胞狀態良好,發貨前保證質量。
 
二、售后
         收到細胞7天內出現狀態不佳等情況請及時反饋,會有技術同步指導操作協助解決,如仍未養活免費重發。建議及時保種,有備無患!
 
三、細胞生長條件:
培養條件   
GIBCO(培養基90% +10%FBS)
溫度                   
                    37℃
空氣條件  
5% CO2,,95% AIR
傳代方法
1:2傳代,2~3天換液
凍存條件
90%FBS+10%DMSO
 
四、細胞收到后處理
    細胞在培養瓶中培養至良好狀態后灌滿*培養液并封好瓶口是細胞運輸的好辦法。收到細胞回到自己的實驗室后,先打開外包裝,用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超凈臺內,嚴格無菌操作。鏡下觀察:未超過80%匯合度時,可將瓶裝的*培養液移入廢液缸中,原瓶(T25瓶)保留6-8ml*培養液,懸浮細胞需離心處理,放入37℃、5%CO2孵箱培養;超過80%匯合度時,根據情況傳代或者凍存,具體操作見細胞培養步驟。

NCI-H2030-GFP人肺癌綠色標記細胞 培養步驟 已通過STR鑒定
 
五、細胞培養步驟
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入6cm皿中,加入約6ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
 
1、貼壁細胞,傳代參考如下:
①. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
②. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
③. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
 
④. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。操作步驟:
請收到細胞后,在倒置鏡下(在4X物鏡)觀察整個細胞生長情況。
(一)如果細胞未長滿,用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內,嚴格無菌操作,打開細胞培養瓶,吸出培養液,換 10ml新鮮培養液后繼續培養。
(二) (二)如果細胞已長滿,即可進行傳代培養。具體步驟如下:
1.棄去培養液,用PBS(不含鈣,鎂離子)洗1-2次。
2.加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,倒放于37℃培養箱1-3分鐘預熱,之后翻轉培養瓶10-30秒后,在倒置顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量*培養基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加*培養基,輕輕打勻后吸出一半,分到新的培養瓶中。
如果沒有特別說明,收到細胞后的次傳代一般是一傳二。

其他細胞如下:

293-LUC(HEK293-LUC)人胚腎細胞-熒光素酶標記

293-GFP(HEK293-GFP)人胚腎細胞-綠色標記

A549-LUC肺腺癌-熒光素酶標記

Bel-7402-GFP人肝癌細胞-綠色標記

C918-GFP人眼脈絡黑色素瘤細胞-綠色標記

CT26.WT-LUC小鼠結腸癌細胞-熒光素酶標記

CT26.WT-GFP小鼠結腸癌細胞-綠色標記

hct116/L-LUC人結腸癌耐奧沙利鉑細胞株-熒光素酶標記

hct116/L-GFP人結腸癌耐奧沙利鉑細胞株-綠色標記

HCT-116-LUC低分化結腸腺癌-熒光素酶標記

HCT-116-GFP低分化結腸腺癌-綠色標記

Hep3B-GFP人肝癌-綠色標記

LLC-LUC小鼠肺癌細胞-熒光素酶標記

LLC-GFP小鼠肺癌細胞-綠色標記

SGC-7901-GFP人胃癌細胞-綠色標記

SMMC-7721-GFP人肝癌細胞-綠色標記

SW620-LUC人結腸癌細胞-熒光素酶標記

SW620-GFP人結腸癌細胞-綠色標記

ARPE19-GFP人視網膜上皮細胞-綠色標記

 

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