上海琛藝實業有限公司經過數年的努力發展已迅速成為集產品研發、生產、經營為一體的專業化生物工程公司。公司新引進細胞上千株,其中人的已通過STR鑒定的有幾百株,歡迎各位選購。。。。。。
【中文名稱】22rv1-GFP人前列腺癌綠色標記細胞 培養步驟 含STR鑒定
【背景資料】 見細胞說明書
【產品來源】 細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國內外著名大學建系
"公司提供貼壁、半貼壁、懸浮、半懸浮、貼壁與懸浮混合等細胞特性,一般細胞培養FBS
量是10%,如果出現細胞狀態不良情況,可以提高FBS量到15%, 細胞待細胞穩定后,調回FBS量10%,對于初次實驗者,一般細胞培養,都需要加入雙抗防止細胞污染,細胞匯合度達到90%,我們開始寄送,這樣可以保持細胞收到時,良好的細胞活力。
· 售前
上海琛藝專業為國內科研提供高品質細胞和優質服務,QC檢測合格后發貨保證細胞狀態良好,發貨前保證質量。
二、售后
收到細胞7天內出現狀態不佳等情況請及時反饋,會有技術同步指導操作協助解決,如仍未養活免費重發。建議及時保種,有備無患!
三、細胞生長條件:
細胞系使用說明書
細胞名稱
EAhy926人臍靜脈融合細胞
細胞背景
在PEG脅迫下,將原代培養的人臍靜脈細胞與抗硫鳥嘌呤的A549克隆株融合,構建了人臍靜脈細胞株, EA.hy926。融合子在HAT培養基上生長并以八因子相關抗原篩選。EA.hy926已經過100次以上的群體倍增(PDLs)。電鏡照片顯示Weibel-Palade小體的細胞質分布以及組織特異性的細胞器,分化的內皮細胞特性如血管生成,體內平衡/血栓形成,血壓及炎癥反應。
貨號
CY1002
種屬
人
細胞用途
僅供科研使用
生長特性
貼壁
培養
培養基:90%DMEM(高糖)+10%FBS
溫度:37℃ 氣相:95%空氣,5%二氧化碳
細胞特性
1) 來源:體細胞融合細胞
2) 形態:內皮細胞樣,貼壁生長
3) 含量:>1x106 個/mL
4) 污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
5) 規格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
22rv1-GFP人前列腺癌綠色標記細胞 培養步驟 含STR鑒定
細胞培養步驟
1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 收到細胞后*傳代推薦將細胞懸液按1:2的比例分到新的含6ml培養基的新皿中或者瓶中,建議凍存一支備用,后續傳代根據實際情況按1:2到1:5的比例進行。
細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。
下面T25瓶為例;
1 細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,細胞變圓脫落后,加入2ml*培養基終止消化,可使用血球計數板計數。
2 1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。
3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
保存
凍存條件:90%*培養液+10%DMSO
(備注:建議使用本公司的冷凍液(H-W-100),用4度保存的冷凍液直接重懸細胞,不能預熱后使用。)
保存條件:液氮存儲
常見問題及解決方案
1.培養瓶有破裂,培養液有漏液:細胞極大可能會污染,所以我們會及時安排幫老師解決。
2.收到細胞后盡快更換為含 10%血清的新鮮培養基,如因特殊情況需要繼續使用原瓶培養基,請在原瓶培養基中額外添加 10%的血清(原瓶培養基的繼續使用時間長不宜超過 72 小時)
3.細胞漂浮:培養瓶不開封,瓶口酒精擦拭后平躺放置在培養箱。1-2小時后觀察,如細胞大部分又貼回瓶底,表明細胞活力正常,剩余漂浮的細胞可以去掉,留8-10ml培養液培養觀察,細胞生長至匯合度80%,進行消化傳代;如細胞還是不貼壁,將細胞離心收集轉到新培養瓶,原培養瓶加部分培養液繼續培養,中間注意觀察,我們的技術人員會一直跟蹤指導,直到問題解決。
上海琛藝細胞培養的優點:
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中,根據要求可始終保持細胞活力,并可長時間監控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態、結構、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件,可以根據實際需要進行人為的控制,同時,可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養一定代數后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術:如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備
記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應用的學科領域較為寬廣,如細胞學、免疫學、腫瘤學、生物化學、遺傳學、分子生物學等;
適用的對象范圍廣,從低等動物到高等動物,一種動物的不同年齡階段以及不同組織,都可進行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經濟
可提供大量、同一時期、重復性好的、生物學性狀相似的實驗對象。
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