SGC7902/DDP-GFP人胃癌順鉑綠色標記耐藥株 培養(yǎng)步驟
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上海琛藝實業(yè)有限公司提供ATCC原代細胞,ATCC菌株代購,同時上海琛藝新增細胞庫,具有自己的研發(fā)細胞培養(yǎng)庫,上千株細胞具有STR鑒定,開春大放送,*,同時還有好禮相送,具體歡迎咨詢我們銷售人員。。。。
SGC7902/DDP-GFP人胃癌順鉑綠色標記耐藥株 培養(yǎng)步驟 含STR鑒定
【細胞傳代】:1:3 傳代
【細胞活力】:90%(Viability by Trypan Blue Exclusion)
【細胞檢測】:細胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌
【細胞凍存】:液氮凍存(基礎培養(yǎng)基+10%DMSO+20%FBS)
【細胞運輸】:干冰運輸(1 Vial)或活細胞運輸(T-25 flasks)
詳細背景: 這株細胞的細胞骨架染色突出呈現(xiàn)肌動蛋白,在細胞質中有豐富的平行微絲。有報道稱在1uM血管緊張素II存在下,它們會收縮。細胞在軟瓊脂中形成克隆,SV40大T抗原陽性。
細胞來源: 細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國內外著名大學建系
SGC7902/DDP-GFP人胃癌順鉑綠色標記耐藥株 培養(yǎng)步驟 含STR鑒定
"購買細胞注意事項:
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。
2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面,OSKMZ-1小鼠誘導型多能干細胞| OSKMZ-1動物
顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落,將細胞置于培養(yǎng)箱內靜置培養(yǎng)過夜,隔天再取出觀察。此時多數(shù)細胞均會貼壁,若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍染色測定細胞活力,如果證實細胞活力正常,請將細胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結果顯示細胞無活力,請拍下照片及時和我們聯(lián)系,信息確認后我們?yōu)槟倜赓M寄送一次。
4. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和公司技術部溝通交流。
規(guī)格: 復蘇T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存1ml凍存管(兩支)
細胞規(guī)格: 1*10(5)/ml——1*10(6)/ml
(二) 慢病毒包裝部分
1. 質粒共轉染細胞:轉染前一天, 293T在10cm培養(yǎng)盤中的細胞達到90%,胰酶消化后,1:3傳入新10cm培養(yǎng)盤中。轉染時,細胞在培養(yǎng)盤中密度達到80%。采用脂質體PEI轉染法使編碼慢病毒包膜蛋白的質粒VSV G, Packaging Mix以及構建的Gluc質粒15μg共轉染。6h后換新鮮DMEM培養(yǎng)基。
2.提取病毒上清:轉染48-72hours后,將含有病毒液的培養(yǎng)基轉移到15ml離心管中,在低溫4攝氏度條件下,3000rpm,離心10min去除片狀沉淀的細胞碎片。
3.濃縮病毒:將病毒上清用0.45um濾器過濾至濃縮離心管中,2000rpm,4℃,15min離心。濃縮液收集于500μl離心管中,-80℃保存。
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SGC7902/DDP-GFP | 人胃癌順鉑耐藥株-綠色標記 |
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