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HPLC進樣方式有哪幾種

來源:上海伍豐科學儀器有限公司   2020年05月12日 18:21  

自動進樣器在色譜分析儀器中有著廣泛應用,液相色譜系統大多使用自動進樣器引入樣品。現在的色譜實驗室,大都使用六通進樣閥或自動進樣器。進樣裝置要求:密封性好,死體積小,重復性好,保證中心進樣,進樣時對色譜系統的壓力、流量影響小。HPLC進樣方式可分為:隔膜進樣、停流進樣、閥進樣、自動進樣。

 

 

 

1、隔膜進樣

用微量注射器將樣品注入專門設計的與色譜柱相連的進樣頭內,可把樣品直接送到柱頭填充床的中心,死體積幾乎等于零,可以獲得的柱效,且價格便宜,操作方便。但不能在高壓下使用(如10MPA以上);此外隔膜容易吸附樣品產生記憶效應,使進樣重復性只能達到1~2%;加之能碉各種溶劑的橡皮不易找到,常規分析使用受到限制。

 

2、停流進樣

可避免在高壓下進樣。但在HPLC中由于隔膜的污染,停泵或重新啟動時往往會出現“鬼峰”;另一缺點是保留時間不準。在以峰的始末信號控制餾分收集的制備色譜中,效果較好。

 

 

 

3、閥進樣

一般HPLC分析常用六通進樣閥(以美國RHEODYNE公司的7725和7725I型常見),其關鍵部件由圓形密封墊子(轉子)和固定底座(定子)組成。由于閥接頭和連接管死體積在存在,柱效率低于隔膜進樣(約下降5~10%左右),但耐高壓(35~40MPA),進樣量準確,重復性好(0.5%),操作方便。

六通閥進樣方式有部分裝液法和*裝液法兩種。①用部分裝液法進樣時,進樣量應不大于定量環體積的50%(多75%),并要求每次進樣體積準確、相同。此法進樣的準確度和重復性決定于注器取樣的熟練程度,而且易產生由進樣引起的峰展寬。②用*裝液法進樣時,進樣量應不小于定量環體積的 5~10倍9少3倍),這樣才能*置換定量環內和流動相,消除管壁效應,確保進樣的準確度及重復性。

六通閥使用和維護注意事項:①樣品溶液進樣前必須用0.45UM濾膜過濾,以減少微粒對進樣閥的磨損。②轉動閥芯時不能太慢,更不能停留在中間位置,否則流動相受阻,使泵內壓力劇增,甚至超過泵的大壓力;轉到進樣位時,過高的壓力將使柱頭損壞。③為防止緩沖鹽和樣呂殘留在進樣閥中,每次分析結束后應沖洗進樣閥。通常可用水沖洗,或先用能溶解樣品的溶劑沖洗,再用水沖洗。

 

 

 

4、自動進樣

用于大量樣品的常規分析。

 

 

液相自動進樣器做為客戶使用來說較關注的問題是:

1.定量是不是準確。現在方法驗證特別多,基本都是外標,所以進樣準確那是必須滴。

2.定位準確。反復進樣,一般半年左右是考驗儀器的時候,半年過去了還那么準確就說明是經的住考驗的,還有就是如果瓶子的位置放錯,放重了,或是沒放,自動進樣器應該有足夠的應對出錯,經過調整后能依然準確定位。

3.防殘留設計。無論采用什么技術,必須小的殘留,這要在洗針設計上下足功夫。

4.價格。

5.進樣速度。簡捷的進樣,快速洗針也要求越來越高。

6.防光照設計。

7.易于是清理及擦拭設計。

8.配套其它部件的設計及價格。

 

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