【產(chǎn)品介紹：TE-13-LUC人食管癌熒光素酶標(biāo)記細(xì)胞 培養(yǎng)步驟 含STR鑒定】

熒光素酶在催化Luciferin氧化成oxyluciferin的過程中，會發(fā)生生物熒光，利用這種特性，可以靈敏高效地檢測基因表達(dá)。將LUC基因整合到腫瘤細(xì)胞系上，在細(xì)胞分裂、轉(zhuǎn)移、分化過程中，熒光素酶均能得到持續(xù)穩(wěn)定的表達(dá)，因此可廣泛應(yīng)用于腫瘤細(xì)胞體內(nèi)體外試驗(yàn)。

白澤醫(yī)療可提供多種LUC標(biāo)記腫瘤細(xì)胞株，包括肺癌、肝癌、胃癌、卵巢癌、宮頸癌等。原始細(xì)胞株來源于美國ATCC，來源明確、質(zhì)量可靠。LUC標(biāo)記細(xì)胞株均經(jīng)過嚴(yán)格的支原體、無菌等檢測；除常規(guī)的熒光驗(yàn)證之外，白澤醫(yī)療還進(jìn)行了抗原標(biāo)記驗(yàn)證，可用于EGFR、HER2、MUC1、IGFR等抗體藥物研發(fā)及相關(guān)研究。

細(xì)胞株均凍存于10%DMSO，便于運(yùn)輸儲存。

來源組織：腎

物種來源：人

腫瘤類型：腎癌

母細(xì)胞來源：ATCC(CRL-1932)

運(yùn)輸方式：干冰運(yùn)輸

儲存條件：液氮

應(yīng)用：

•     監(jiān)控早期癌細(xì)胞發(fā)育。

•     監(jiān)控體內(nèi)癌細(xì)胞生長和代謝。

•     評估動物總體腫瘤負(fù)擔(dān)。

•     其他動物實(shí)驗(yàn)體內(nèi)治療結(jié)果跟蹤。
產(chǎn)品名稱：TE-13-LUC人食管癌熒光素酶標(biāo)記細(xì)胞 培養(yǎng)步驟 含STR鑒定
?產(chǎn)品編號： CL0028
?細(xì)胞數(shù)量： 1*10^6
?細(xì)胞來源： atcc
?組織來源： 胸主動脈平滑肌
?細(xì)胞種屬： 大鼠源
?生長特性： 貼壁
?培養(yǎng)基： DMEM+10%FBS
?形態(tài)特征： 成纖維細(xì)胞
?傳代方法： 1:2 - 1:3
?培養(yǎng)條件： 胎牛血清至終濃度為10％。環(huán)境：空氣，95％;二氧化碳（CO2），5％；溫度，37℃
?細(xì)胞描述： 當(dāng)培養(yǎng)物達(dá)到穩(wěn)定期時，細(xì)胞表現(xiàn)出酶肌激酶和肌酸磷酸激酶（CPK）的活性增加。 肌肉型CPK在細(xì)胞分裂停止后合成。
?細(xì)胞凍存： 液氮凍存（凍存液基礎(chǔ)培養(yǎng)基+20%FBS+10%DMSO）
?細(xì)胞運(yùn)輸： 干冰運(yùn)輸（2ml凍存管）或活細(xì)胞運(yùn)輸（T25瓶）
注意事項(xiàng)
凍存細(xì)胞接收后的處理：
1.干冰運(yùn)輸，收到細(xì)胞后立即轉(zhuǎn)入-80℃冰箱短暫中轉(zhuǎn)或直接復(fù)蘇；
2.收到細(xì)胞后，若發(fā)現(xiàn)干冰已經(jīng)*揮發(fā)、凍存管瓶蓋破裂脫落,請立即拍照后與我們聯(lián)系。

復(fù)蘇細(xì)胞接收后的處理：
1.收到細(xì)胞后，請首先檢查培養(yǎng)瓶是否破損或漏液，培養(yǎng)液是否混濁，如有漏液及培養(yǎng)液混濁情況請立即拍照把圖片發(fā)給我們。
2.75%酒精消毒瓶身后放培養(yǎng)箱中靜置4-6h后，在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)并拍照100倍和200倍的照片，若有貼壁細(xì)胞脫落，可收集上清離心，將沉淀用新的培養(yǎng)基接種至新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中。
3.建議收到當(dāng)天不要消化處理，如果細(xì)胞長滿90%，可選擇傳代處理。
4.如您收到細(xì)胞3天內(nèi)沒有反饋相關(guān)問題，出現(xiàn)的細(xì)胞問題將不提供免費(fèi)重發(fā)服務(wù)。

細(xì)胞培養(yǎng)方法：
1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%胰酶（T25瓶），使胰酶覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%胰蛋白酶（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化；
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。